en بهينه‌سازي تخليص سلولهاي دندريتيك طحال موش به منظور استفاده در تخليص و مطالعة سلولهاي دندريتيك ارگانهاي توليد مثل سلولهاي دندريتيك، سلولهاي اصلي عرضه كنندة آنتي‌ژن و مسئول القاء پاسخهاي ايمني اوليه بوسيله لنفوسيت‌هاي T هستند. اگرچه سلولهاي دندريتيك در بسياري از بافت‌هاي لنفاوي حضور دارند ولي تعداد آنها بسيار كم بوده و كمتر از 5/0% سلولهاي هسته دار اعضاء لنفوئيدي محيطي را به خود اختصاص مي‌دهند. در اين پژوهش، روش تخليص سلولهاي دندريتيك از طحال موش با بازده و خلوص قابل توجه با استفاده از يك تكنيك سه مرحله‌اي گزارش شده است. مراحل تخليص به ترتيب عبارت بود از: هضم آنزيمي بافت توسط كلاژناز، جداسازي سلولهاي كم چگال با استفاده از محيط اپتي پرپ و اتصال به پلاستيك. با بكارگيري تكنيك‌هاي فوق‌الذكر از هر طحال 105 × 7-5 سلول دندريتيك با خلوص بالاتر از 97% بدست آمد. در دسترس‌بودن سلولهاي دندريتيك خالص، ما را قادر خواهد ساخت كه خصوصيات مختلف اين سلولها نظير مرفولوژي، ايمونوفنوتيپ و نقش آنها را در سيستم ايمني، بيشتر و دقيق‌تر مورد ارزيابي قرار دهيم. از طرف ديگر با توجه به حضور سلولهاي دندريتيك در اعضاي توليد مثل، از اين روش مي‌توان در تخليص و مطالعه سلولهاي دندريتيك اعضاء مذكور استفاده كرد. Dendritic cells (DC) are the principal antigen-presenting cells (APC) responsible for induction of primary immune responses by T lymphocytes. Although DCs are present in most lymphoid tissues, they occur in very low frequency accounting for 0.5% or less of nucleated cells in peripheral lymphoid organs. In the present study, we report the purification of DCs from mouse spleen with high yield and purity using a three-step purification technique including: collagenase digestion of tissue, selection of low-density cells using Optiprep density gradient medium and plastic adherence. By using techniques outlined above, we obtained 5-7×107 DC/spleen with purity³ of 97%. Such large numbers of purified DCs enables us to further document their different characteristics including morphology, immunophenotype and to evaluation of their role in immune system. Finally, since DCs have been reported to be present in all reproductive organs, we suggest that this protocol be used for isolation and purification of DCs from those organs for further in vitro studies. سلول های دندریتیک، طحال، تخلیص، سانتریفوژ گرادیان غلظتی Dendritic cell, Spleen, Purification, Density gradient centrifugation 17 30 https://www.jri.ir/article/107 https://www.jri.ir/documents/fullpaper/fa/107.pdf Amir HassanZarnaniNanobiotechnology Research Center, Avicenna Research Institute (ACECR), Tehran, Iranامیرحسنزرنانیzarnani25@yahoo.com241Seyyed MohammadMoazzeniImmunology Department, Faculty of Medical Science, Tarbiat Modarres University, Tehran, Iranسيد محمدموذني242FazelShokriImmunology Department, Faculty of Medical Science, Tehran University of Medical Science, Tehran, Iranفاضل شكري 140MojdehSalehniaAnatomy Department, Faculty of Medical Sciences, Tarbiyat Modares University, Tehran, Iranمژدهصالح نيا243Ali AhmadBayatNanobiotechnology Research Center, Avicenna Research Institute (ACECR), Tehran, Iranعلي احمدبيات244MahmoodJeddi-TehraniNanobiotechnology Research Center, Avicenna Research Institute (ACECR), Tehran, Iranمحمود جدی‌تهرانی54