en نقش پروتئينهاي سطح اسپرم با منشاء اپي ديديم بر فرآيند لقاح درطي عبور اسپرم از اپي ديديم، جايگاهي كه درآن توانائي اسپرم براي لقاح تخمكها توسعه مي يابد، چندين شاخص آنتي ژني جديد در سطح اسپرم ظاهر مي گردد. تعدادي از آنها پروتئينها و گليكوپروتئينهايي با منشاء اپي ديديم مي باشند. هدف از مطالعة اخير بررسي نقش پروتئينهاي ترشحي اپي ديديم بر روي قدرت باروري اسپرم مي باشد. سلولهاي اپي تليال بخش ابتداي اپي ديديم rat در محيط RPMI حاوي فاكتورهاي رشد و آندروژنها كشت داده شد. براي شناسائي پروتئينهاي ترشحي اپي ديديم، نشاندار كردن اين پروتئينها توسط (Cys , Met) – [ 35S ] انجام شد. محيط كشت نشاندار حاصل، پس از جمع آوري تحت SDS – PAGE قرارگرفت، براي 8 پروتئين ترشحي اپي ديديم نيز در خرگوش آنتي سرم تهيه گرديد. ايمونوژن مورد استفاده نوار باريكي از ژل پلي اكريل آميد ليوفيليزه شده حاصل از الكتروفورز بر روي حجم زيادي نمونه حاوي پروتئين كاملاً خالص بود. انكوباسيون اسپرم سالم rat با اين آنتي سرمها نشان دهندة وجود پروتئينهاي ترشحي اپي‏ديديم در سطح اسپرم بود. اثر اين آنتي سرمها بر روي لقاح خارج رحمي نيز مورد بررسي قرار گرفت. سلولهاي اپي تليال اپي‏ديديم در محيط كشت حدود30-20 پروتئين ترشح مي كنند، آنتي سرم با تيتر بالا براي 8 عدد از اين پروتئينها توليد گرديد. سه آنتي سرم (پروتئينهاي 20و24و72 كيلودالتون )‌ با سطح اسپرم rat واكنش نشان دادند، و از ا ين ميان فقط آنتي سرم پروتئين kD20 باعث كاهش ميزان لقاح گرديد (28% درمقابل 89% براي گروه كنترل). بنابراين روند بلوغ اسپرم در اپي ديديم با ترشح تعدادي از پروتئينها توسط سلولهاي اپي تليال اپي ديديم همراه مي‏باشد. تعدادي از اين پروتئينها به غشاء پلاسمائي اسپرم متصل مي گردند، از اين ميان پروتئيني با وزن مولكولي kD 20 داراي نقش اساسي در قدرت باروري اسپرم مي‏باشد. During transit of spermatozoa through the epididymis, where develop its capacity to fertilize oocytes, several new antigenic determinants appear on surface of spermatozoa. Many of these are proteins and glycoproteins with epididymal origin. The aim of this study was evaluation the role of epididymal secretory proteins on fertilizing ability of spermatozoa. In This study, epithelial cells from proximal portion of rat epididymis were cultured in RPMI medium supplemented with growth factors and androgens. To identify epididymal secretory proteins, pulse labeling with [35S]-(Met, Cys) was used. Labeled conditioned medium recovered and subjected to SDS-PAGE and flurography. Antiserum against 8 secretory proteins were produced in Rabbits. The immunogens were lyophilized narrow strip of polyacrylamide gel from preparative electrophoresis with ultrapure proteins. Incubation of intact rat spermatozoa with these antisera was revealed secretory proteins on surface of spermatozoa. The effects of these antisera on in vitro fertilization were evaluated. The results showed that epithelial cells secreted about 20-30 proteins in culture medium. High titer antisera for 8 secretory proteins were produced. Three antisera were reacted with surface of rat spermatozoa (20, 24 & 72 kD proteins), and only 20 kD protein antiserum decreased fertilization rate. (28% in treatment group against 89% for control group). In Conclusion, the epididymal maturation process of spermatozoa was associated with the secretion of a number proteins by epididymal epithelial cells, many of these proteins bound to plasma membrane of spermatozoa. Only secreted 20 kD protein has a critical role in fertilizing ability of spermatozoa. پروتئین ترشحی، اپی دیدیم، لقاح خارج رحمی، بلوغ اسپرم، رت Secretory protein, Epididymis, Rat, IVF, Sperm maturation 43 55 https://www.jri.ir/article/33 https://www.jri.ir/documents/fullpaper/fa/33.pdf Mohammad RezaSadeghiReproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR, Tehran, Iran محمدرضاصادقی77Mohammad MehdiAkhondiReproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR, Tehran, Iranمحمدمهدیآخوندی21MahinZahraeiMedical Biochmistry Department, Faculty of Medicine, Tehran Medical Sciences University, Tehran, Iranمهين زهرائي99