2005 6 2 22 87

بررسي اثرات ضايعه نخاعي مزمن بر وضعيت کروماتين و DNA اسپرم‌هاي اپيديديمي رت The effect of chronic spinal cord injury on chromatin and DNA integrity of spermatozoa aspirated from epididymis of Rat 2 1 زمينه و هدف: کاهش باروري يکي از مشکلات اساسي بيماران ضايعة نخاعي (SCI) مي‌باشد. عدم انزال مناسب و کاهش کيفيت اسپرم همانند کم شدن قابليت حيات، کاهش ميزان تحرک و افزايش درصد اسپرم‌هاي با مورفولوژي ناهنجار به عنوان دلايل اصلي ناباروري در افراد مبتلا به SCI عنوان مي‌شوند. از آنجائيکه به دنبال ضايعة نخاعي، عصب‌دهي اتونوم اپيديديم نيز مختل مي‌گردد، اسپرمها به مدت طولاني در اين ارگان باقي‌مانده و تحت تأثير گونه‌هاي فعال اکسيژن (ROS) قرار مي‌گيرند. از طرفي به دليل تغيير عملكرد طبيعي اپيديديم، ميزان تحرک و فرآيند بلوغ هستة اسپرمها نيز دچار تغيير احتمالي خواهند شد. با توجه به اهميت تراکم کروماتين اسپرم در پتانسيل باروري، مطالعه‌اي با هدف بررسي اثرات ضايعه نخاعي مزمن بر کيفيت کروماتين و DNA اسپرم‌هاي اپيديديمي در مدل حيواني رت انجام شد. روش بررسي: تعداد 45 رت نر بالغ از نژاد Wistar انتخاب و به سه گروه SCI، شم و کنترل تقسيم شدند. گروه SCI به دنبال انجام لامينکتومي در سطح T10، توسط وزنه‌اي فلزي با وزن g15 که از ارتفاع cm10 رها گرديد، دچار ضايعة نخاعي شدند. در گروه شم تنها عمل لامينکتومي صورت پذيرفت و در گروه کنترل هيچ عملي انجام نگرديد. پس از هشت هفته اسپرم‌هاي اپيديديم هر سه گروه جهت بررسي پارامترهاي مورفولوژي، تحرک و ارزيابي کيفيت کروماتين توسط تست‌هاي آنيلين بلو، کرومومايسين A3 (CMA3)، SDS و آکريدين اورانژ (Ao) مورد آزمايش قرار گرفتند. داده‌ها توسط نرم‌افزار SPSS و براساس آزمون‌هاي آماري آناليز واريانس يكطرفه، كروسكال واليس و من‌ويتني مورد تجزيه و تحليل قرار گرفتند. 05/0p< به عنوان سطح معني‌داري در نظر گرفته شد. نتايج: در بررسي نمونه‌ها پارامترهاي مورفولوژي و تحرک در گروه SCI نسبت به دو گروه ديگر تفاوت معني‌داري نشان داد. تست‌هاي ارزيابي کروماتين شامل تست‌هاي آنيلين‌بلو و CMA3 تفاوت معني‌داري را در بين سه گروه نشان نداد؛ در حاليکه تست‌هاي SDS و AO تفاوت معني‌داري در بين گروه SCI و دو گروه ديگر مشاهده شد. نتيجه‌گيري: فرآيند تراکم کروماتين اسپرم در دو فاز بيضه‌اي و اپيديديمي صورت مي‌پذيرد. به دنبال ضايعة نخاعي، فاز بيضه‌اي که جابجايي هيستون توسط پروتامين مي‌باشد متأثر نمي‌شود، در حاليکه فاز اپيديديمي که مربوط به تشکيل باند‌هاي دي‌سولفيدي در بين و داخل مولکول‌هاي پروتامين مي‌باشد، توسط SCI متأثر مي‌گردد. به طور کلي مي‌توان گفت که علاوه بر کاهش پارامترهاي اسپرم، ايجاد اختلال در فرآيند بلوغ هسته و بروز ناهنجاري‌هايي در ساختار DNA اسپرم، مي‌تواند به عنوان يکي از دلايل اصلي کاهش پتانسيل باروري در وضعيت SCI در نظر گرفته شود. لذا براساس نتايج اين مطالعه مي‌توان ضمن بررسي اسپرم افراد SCI در صورت افزايش ميزان ناهنجاري‌هاي كروماتيني با انجام تدابير درماني خاص، از ميزان اين آسيبها كاست و در زمان انجام روش‌هاي ART با انجام تست‌هاي تشخيصي پيش آگهي ميزان موفقيت روش‌هاي درماني را به دست آورد. 2 Introduction: Infertility is considered as one of the major problems associated with spinal cord injured (SCI) men. Anejaculation as well as diminished sperm quality such as low sperm viability, low motility, and increased abnormal sperm morphology are the factors involved with infertililty following SCI. Since, epididymal autonomic innervation is impaired following SCI, the sperma-tozoa may remain in epididymis for an unnecessary longer time. This may subsequently disturb the sperm functional capability, motility potential, and sperm nuclear maturity with the presence of free oxygen species (ROS). The main objective was to evaluate the effect of chronic SCI on chro-matin integrity and DNA of spermatozoa aspirated from epididymis of Wistar rats. Materials and Methods: A total of 45 adult Wistar rats were divided into 3 groups of SCI, sham, control. Following laminectomy, SCI was induced with a 15g weight dropped from a distance of 10cm onto exposed dura matter (T10). Sham group underwent laminectomy of T10 only; while, control rats were not exposed to any type of injury or medication. The epididymal sperms were aspirated after 8 weeks for analysis of sperm parameters and sperm chromatin integrity with aniline blue, chromomycin A3(CMA3), SDS, and acridine orange(AO) tests. The data were analy-zed with SPSS (version 10). Results: The sperm parameters of SCI rats were significantly changed compared with other groups (p<0.05). Also, aniline blue as well as CMA3 tests were not changed in different samples (p>0.01). However, SDS and AO tests were significantly changed in SCI samples when compared with other groups of sham and control. Conclusion: Sperm chromatin condensation takes place during two phases of testicular and epididymal. Following SCI, testicular phase (histone replacement with protamine) is not affected; while, epididymal disulphide bond formation within protamine molecules is disturbed. Therefore, chronic SCI disturbs sperm parameters as well as sperm nuclear maturity, and DNA integrity. This may directly reduce the fertility potential following SCI. 127 140 Alireza A Talebi علیرضا طالبی Infertility Research and Clinical Center, Shahid Sadoughi Medical Sciences University Infertility Research and Clinical Center, Shahid Sadoughi Medical Sciences University Iran ali1345talebi@yahoo.com Ahmad A Hossaini احمد حسینی Cellular &amp; Molecular Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences Cellular & Molecular Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Sciences Iran Mohammad Ali MA Khalili محمد علی خلیلی Isfahan Infertility Clinic, Isfahan University of Medical Sciences Isfahan Infertility Clinic, Isfahan University of Medical Sciences Iran Yousef Y Sadeghi یوسف صادقی Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences Department of Anatomy, Faculty of Medicine, Shahid Beheshti University of Medical Sciences Iran Mohammad Hossein MH Nasr-Esfahani Royan Institute Royan Institute Iran Spinal cord injuryChronicChromatinDNASpermatozoaEpididymisRat 181.pdf Sonksen J., Sorensen F.B. Fertility in men with spinal cord or cauda Equina lesions. Seminars in neurobio-logy. 1992;12(2):106-113.##Linsenmeyer T.A., Perkash I. Infertility in men with spinal cord injury. Arch phys Med Rehabil. 1991;72: 747-54.##Sedor J.F., Hirsch I.H. Evaluation of sperm morpholo-gy of electeroejaculates of spinal cord- injured men. Fertil Steril.1995;63:1125-27.##Hosea F.S. Huang. Ming- Tang Li. Spinal cord contu-sion impairs sperm motility in the rat without disrupt-ing spermatogenesis. J Androl.2003;24(3):371-80.##Brackett N.L., Bloch W.E. Predictors of necrospermia in men with spinal cord injury.J Urol.1998;159(3):844-47.##Huang H.F, Linsenmeyer T.A. Acute effects of spinal cord injury on the pituitary- testicular hormone axis and sertoil cell functions. J Andrology.1995;16(2):148-57.##Hirsch I.H., Bin Huang. Chancellor M.B. spermatogenesis in Ealry and chronic phases of experimental SCI in the Rodent. J Andrology.1999;20(1):63-71.##Huang H.F., Linsenmeyer T.A., Anesetti R. Suppress-ion and Recovery of spermatogenesis Followng SCI in the rat. J Andrology.1998;19(1):72-79.##Bors E., Engle E.T. Fertility in paraplegic males;A Pre-liminary report of endocrine studies.J Clin Endocrinol. 1950;10:381-98.##Brindley G.S. Deep scrotal temperature and the effect on it of clothing and Paraplegia. Br J Urol.1982;54:49-55.##Sun J.G., Jurisicora A., Capser R.F. Detection of DNA fragmentation in human sperm correlation with fertili-zation in vitro. Boil Reprod.1997;56(3):602-607.##Filator M.V., Semonova E.V., Vorobeva O.A. Relation-ship between abnormal sperm chromation packing and IVF results. Mol Hum Reprod.1999;5(9):825-30.##Francarilla S., Cordeschi G. Chromatin defects in normal and malformed human ejaculated and epidi-dymal spermatozoa. J Reprod Fertile.1996;106:259-68.##Sward W.S., Coffey D.S. DNA packaging and organi-zation in mammalian spermatozoa: comparision with somatic cells. Biol Reprod.1991;44:569-74.##Mahi C.A., Yanagimachi R. Induction of nuclear conde-nsation of mammalian sperm in vitro. J Reprod Fertile. 1975;44:293-96.##Spano M., Bonde J.P., Hyollund H.I., Kolstad H.A. Sperm chromation damage impairs human fertility. Fertil Steril.2000;73:43-50.##Evenson D.P., Darzynkiewicz Z., Melamed M.R. Rela-tion of mammalian sperm chromatin heterogeneity to fertility. Science.1980;210:1131-33.##Padron O.F., Brackett N.L., Sharma R.K., Lynne C.M., Thomas A.J.Jr., Agarwal A. Seminal reactive oxygen species and sperm motility and Morphology in men with spinal cord injury. Fertil Steril.1997;67(6):1115-20.##Kempinas W.D., Suarez J.D., Roberts N.L., Strader L.F., Ferrell J., et al. Fertility of rat epididymal sperm after chemically and surgically induced sympathec-tomy. Biol Reprod.1998;59(4):897-904.##Dana Allen. Handbook of veterinary Drugs.1993 Lippin-cot Co.pp:530.##Rabchevsky A.G., Fugaccia I., Sullivan P.G., Blades D.A., Scheff S.W., Patrick G. Efficacy of Methylpre-dnisolone therapy for the injured rat spinal cord. J Neurosci Res.2002;68(1):7-18.##World Health Organization. Laboratory manual for the examination of human semen and semen- cervical mucus interaction. 3rd Edition. Newyork: Cambridge universitery Press.1999;27.##Auger J., Mesbah M., Huber C., Dadoune J.P. Aniline blue staining as a marker of sperm chromatin defects. Int J Andr.1990;13(6):452-62.##Erenpreiss J., Bars J., Lipatnikova V., Erenpreisa J., Zalkalns J., et al. Comparative study of cytochemical tests for sperm chromatin integrity. J Androl.2001;22 (1):45-53.##Nasr- Esfahani M.H., Razavi S., Mardani M. Relation Between different human sperm nuclear Maturity tests and in vitro fertilization. J Assist Reprod Genet.2001; 18(4):219-25.##Esterhuizen A.D., Franken D.R., Lourens J.C., Van Zyl C., Muller II., et al.Chromatin packaging as an ind-icator of human sperm dysfunction. J Assist Reprod Gente.2000;17(9):508-14.##Said S., Funahashi H., Niwak K., DNA Stability and thiol- disulphide status of rat sperm nuclei during epi-didymal maturation and penetration of oocytes. Zygote. 1999;7(3):249-54##Barrera C., Mazzolli A.B., Pelling C., Strockert J.C. Metachromatic staining of human sperm nuclei after reduction of disulphide bonds. Acta Histochem.1993; 94 (2):141-9.##Billups K.L., Tillman S.L., Change T.S.K. Reduction of epididymal sperm motility after ablation of the IMG in the rat. Fertil Steril.1990;53:1076-82.##Linsenmeyer T.A., Ottenweller J.E., Huang H.F.S. Epididymal sperm transport in normal and recent spinal cord injured Sprague Dawley rats. J Spinal Cord Med. 1999;22:102-6.##Hou J.W., Chen D., Jeyendran R.S. Sperm nuclear maturity in spinal cord-injured men. Arch Med Rehabil. 1995;76(5):444-5.##Sakkas D., Manicardi G., Bianchi P.G. Relationship between the presence of endogenous nick and sperm chromatin packaging in maturing and Fertilizing mouse spermatozoa. Biol Reprod.1995;52(5):1149-55.##Clausen O.P., Parvis K., Stien R. Sperm quality asse-ssed by flow cytometry and accessory sex gland func-tion in spinal cord injured men after repeated vibration-induced ejaculation. Paraplegia.1993;31(1):3-12.##Charles C., Robert M.K. Scrotal heat stress induces altered sperm chromatin structure. Biol Reprod.1999; 60: 615-20.##Sailer B.L., Sarkar L.J., Bjordahl J.A., Jost L.K., Evenson D.P. Effects of heat stress on mouse testicular cells and sperm chromatin structure. J Androl.1997; 8(3):294-301.##Golan R., Cooper T.G., Oschry Y., Oberpenning F., Schulze H., et all. Changes in chromatin condensation of human spermatozoa during epididymal transit as determined by Flow cytometry. Hum Reprod.1996;11(7):1457-62.##Ricker D.D., Chamness S.L., Hinton B.T., Chang T.S. Changes in luminal fluid protein composition in the rat cauda epididymidis following partial sympathetic denervation. J Androl.1996;17(2):117-26.##Brackett N.L., Lynne C.M., Weizman M.S., Bloch W. E. Endocrine profiles and semen quality of spinal cord injured men. J Urol.1994;151(1):114-9.##Brackett N.L., Davi R.C. Seminal plasma of spinal cord injured men inhibits sperm motility of normal men. J Urol.1996;155:1632-1635.##Saleh R., Agarwal A. Oxitative stress and male infer-tility. J Androl.2002;23;737-52.##Sharma R.K., Agarwal A. Role of reactive oxygen species in male infertility. Urology.1996;48:835-50.##Irvine D.S., Twigg J.P., Gordon E.L., Fulton N., Milne P.A., et al. DNA integrity in human spermatozoa. J Andrology.2000;21(4):33-443.##Hodson N. The nerves of the testis, epididymis, and scrotum. The testis. Newyork, Academic press.1970; 47-99.##Wanichanon Ch., Roberts K.U., Chipona A.G., et al. Chromatin condensation during spermiogenesis in rats. Science Asia.2001; 27:211-220.##

ارزيابي و مقايسه محيطها و روشهاي مختلف انجماد و نگهداري اسپرم (بانك اسپرم) The assessment and comparison of different media and methods of sperm cryopreservation (Sperm banking) 2 1 زمينه و هدف: انجماد شاخه‌اي از علم كرايوبيولوژي است كه به حفظ و نگهداري طولاني مدت سلول در دماي بسيار پايين مي‌پردازد. انجماد اسپرم به طور معمول در مراكز درمان ناباروري و بانك‌هاي نگهداري اسپرم و صنعت دامپروري انجام مي‌شود. روند انجماد همواره سبب كاهش عملكرد و ظرفيت باروري اسپرمها مي‌گردد؛ چند سالي است كه تأثير روشها و محيط‌هاي مختلف انجماد در تحرك اسپرم مورد ارزيابي قرار گرفته است. با اين وجود هرگز بهترين محيط انجماد اسپرم معرفي نشده است و بنابراين روش استاندارد انجماد اسپرم نيز وجود ندارد؛ لذا معرفي تكنيك مناسب انجماد و نيز محيط مناسب انجماد بر اساس يافته‌هاي تجربي بسيار ضروري به نظر مي‌رسد. بنابراين هدف اصلي اين مطالعه بررسي ميزان بقا و تحرك اسپرم طي روند انجماد به كمك سه محيط مختلف انجماد شامل HSPM، TYBG و GEYC با دو روش انجماد آهسته به كمك دستگاه (برنامه‌ريزي شده) و روش غيردستگاهي (انجماد در فاز بخار ازت مايع) مي‌باشد. روش بررسي: تعداد22 نمونه مايع سمينال از افراد طبيعي، در ظروف يكبار مصرف استريل جمع‌آوري شد. آناليز مايع سمينال مطابق استاندارد WHO انجام گرديد. برنامه انجماد آهسته با دستگاه (روش برنامه‌ريزي شده) و انجماد در فاز بخار ازت مايع (روش غيردستگاهي) مطابق پروتكل موجود انجام شد. غلظت اسپرم قبل از انجماد و درصد تحرك بر روي نمونه‌هاي تازه و نيز ذوب شده پس از يك هفته ارزيابي گرديد. درصد بازيافت اسپرم متحرك تحت عنوان فاكتور بقاء (CSF) تعريف شد. هر نمونه سيمن به 3 قسمت تقسيم و هر قسمت با يكي از محيطها مخلوط گرديد. مخلوط نمونه با هر يك از محيطها به دو بخش تقسيم شدند. بخشي از نمونه با هر يك از سه محيط مختلف به روش فاز بخار ازت مايع و بخش ديگر توسط دستگاه به روش آهسته منجمد گرديدند. آناليز آماري با استفاده از برنامه SPSS ويرايش11، آزمون t- test جهت مقايسه تحرك اسپرمها قبل از انجماد و بعد از ذوب كردن با دو روش مختلف انجماد وآناليز واريانس يك طرفه و آزمون تقريبي LSD جهت مقايسه تحرك قبل و بعد از انجماد با سه محيط مختلف انجام شد و سطح معني‌داري 05/0 در نظر گرفته شد. نتايج: براساس نتايج، ميانگين درصد تحرك اسپرم قبل از فريز كردن 29/813/46% بوده، اما پس از ذوب طي روش انجماد آهسته با دستگاه، با محيط‌هاي HSPM (59/16%)، محيط GEYC (57/431/16%) و محيط TYBG (75/404/16%) و همچنين طي روش انجماد در فاز بخار ازت با محيط‌هاي HSPM (55/495/16%)، محيط GEYC (14/513/14%) و محيط TYBG (47/418/14%) كاهش چشمگيري نشان داد. تفاوت معني‌داري بين روش دستگاهي و روش فاز بخار ازت با هر يك از دو محيط GEYC (001/0=p) و TYBG (007/0=p) مشاهده گرديد. همچنين تفاوت معني‌داري بين محيط HSPM و دو محيط GEYC (05/0=p) و محيط TYBG (05/0=p) وجود داشت. نتيجه‌گيري: براساس يافته‌هاي اين مطالعه پس از ذوب كردن اسپرم به دنبال روش انجماد آهسته با دستگاه و روش استفاده از فاز بخار ازت مايع با هريك از سه محيط HSPM، GEYC و TYBG كاهش چشم‌گيري در تحرك اسپرم نسبت به قبل از انجماد ملاحظه مي‌گردد. ولي بهترين بازده تحرك و ميزان بقا اسپرم پس از ذوب طي روش انجماد آهسته توسط دستگاه بدست آمد و در مقايسة محيط‌هاي انجماد، در محيط HSPM به صورت معني‌داري ميزان بقاء اسپرمها پس از ذوب نسبت به محيط‌هاي TYBG و GEYC(05/0P-value=) بالاتر بود؛ ولي با توجه به عدم امكان دسترسي به دستگاه انجماد در تمامي مراكز، استفاده از محيط‌ انجماد HSPM و روش انجماد در فاز بخار براي نمونه‌هاي سيمن نرمال توصيه مي‌گردد. 2 Introduction: Cryopreservation is a branch of cryo biology concern with the maintenance of cells during prolonged storage in the frozen state at ultra low temperature. Sperm cryopreservation is routinely perfor-med in andrology laboratory and fertility centers and industry.Cryopreservation decrease sperm quality and its Fertilizing capacity. Evaluation of different sperm cryo-media and methods have been performed for several years. Yet, it is not known the best media and technique for sperm cryopreservstion. Thus it seems very necessary to set a sperm cryo-media and method base on experimental finding. Therefore, the aim of this study is the assessment of sperm survival and motility during cryopreservation by three different media including HSPM (Human Sperm Preservation Medium), TYBG (Test-Yolk Buffer) and GEYC (Glycerol Egg Yolk Citrate) and two different cryo-techniques including programmable (with apparatus) and using vapor phase (without apparatus). Materials and Methods: 22 samples were collected of normal male into sterile container. Sperm analysis was performed on the base of WHO criteria and freezing program including programmable and vapor pha-se was performed. Prefreezing sperm concentration and motility was evaluated before and after freezing and subsequently survival rate (CSF) was calculated. Each sample was divided in three parts and mixed with three different medium, subsequently at least two straws filled of each sample. One straw freezed with equipment and another one in vapor phase. The SPSS (Edition 11.0) statistical program was utilized for statistical analysis and t-test was used to compare sperm motility prefreezing and post thawing with two different cryopreservation methods and ANOVA/LSD was used to compare sperm motility with three different cryopreservation media. Significant level was considered p<0.05. Results: Base on our result, sperm motility was %46.138.29 prefreezing , but considerably decreased post thawing by programmable technique in HSPM (%16.95), GEYC (%16.314.57) and TYBG (%16.04 4.75) and also by using vapor phase technique in HSPM (%16.954.55), GEYC(%14.135.14) and TYBG (%14.184.47). There was significantly difference between programmable and vapor phase technique in GEYC (p=0.001) and TYBG (p=0.007). There was also significant difference between HSPM and both other media (p=0.05). Conclusion: According to our study, sperm thawing after its freezing by liquid Nitrogen vapor phase in three different media (HSPM, GEYC, TYBG) leads to significant reduction in sperm motility. The best result in sperm motility and survival achieved through programmable thawing with apparatus and in comp-aring freezing media, HSPM media significantly has higher survival rate in comparison with TYBG and GEYC media (p-value= 0.05). Since the freezing apparatus is not available in most centers therefore, utilizing HSPM freezing media and vapor phase freezing method would be recommended for normal semen samples. 140 153 Asghar A Talebian اصغر طالبیان Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Iran Mohammad Reza MR Sadeghi محمدرضا صادقی Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Iran Hooman H Sadri-Ardekani هومن صدری‌اردکانی Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Iran Masoumeh M Bolourzadeh معصومه بلورزاده Avicenna Infertility Clinic, Avicenna Research Institute (ACECR) Avicenna Infertility Clinic, Avicenna Research Institute (ACECR) Iran Mohammad Mehdi MM Akhondi محمدمهدی آخوندی Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Reproductive Biotechnology Research Center, Avicenna Research Institute, ACECR Iran akhondi@avicenna.ac.ir Sperm bankCryopreservationCryo-mediaHSPMGEYCTYBGSlow freezingVapor phase 182.pdf Mortimer D. Practical Laboratory Andrology. Oxford University Press incorporated. Chapt. 14, Semen cryo-preservation.1994;pp:301-323.##Shaw J.M., Oranratnachai A., Trounson A.O. Cryopre-servation of oocytes and embryos. Chapter 16. In: Handbook of Invitro Fertilization Second Edition. Edit-ed by Alan O. Trounson and David K. Gardner. CRC press Inc.2000.##Brotherton J. Cryopreservation of human semen. Arch of Androl.1990;25:181-195.##Mahony M.C., Morshedi M., Scott R.T., De Villiers A. Erasmus E. Role of spermatozoa cryopreservation in assisted reproduction. In: human spermatozoa in assis-ted reproduction. Edited by Acosta A.A., Swanson R. J., Ackerman S.B., kruger T.A.F., Van Zyl J.A., and Menkveld R. Baltimore: Williams & wilkins Co., Cha-pt. 10, pp:100,1990.##Anger J.T., Gilbert B.R. Goldstein M. Cryopreservation of sperm: Indications, Methods and Results. J Urol. 2003;170:1079-1084.##Jahnel F. Uber die wiederstandsfahigkeit von mens-chlichen spermatozoan gegenuber starke kalte. Klin Wschr.1937;17:1273-1275.##Polge G., Smith A.U., Parkes A.S. Retrival of (bovine) spermatozoa after vitrification and dehydration at low temperatures. Nature.1949; 164:666-669.##Bunge R.G., Sherman J.K. Fertilizing capacity of fro-zen human spermatozoa. Nature.1953;172: 767.##Prins G.S., Weidel L. A comparative study of buffer systems as cryoprotectants for human spermatozoa. Fertil Steril.1986;46(1):147-149.##Mahadevan M., Trounson A.O. Effect of cryoprotec-tive media and dilution methods on the preservation of human spermatozoa. Andrologia.1983;15(4):355-366.##Stanic P., Tandara M., Sonicki Z., Simunic V., Radak-ovic B., Suchanek E. Comparison of protective media and freezing techniques for cryopreservation of human semen. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.2000;91:65-70.##Nallella K.P., Sharma R.K., Allamaneni S.S.R., Aziz N., Agarwal A. Cryopreservation of human spermato-zoa: comparison of two cryopreservation methods and there cryoprotectants. Fertil Steril.2004;82(4):913-918.##Gardner D.K., Weissman A., Howles C.M., Shoham Z. Assisted Reproductive Techniques. Chapt. 5: Evalua-tion of sperm.2001;P:61-76.##Hammadeh M.E., Georg T., Rosenbaum P., Schmidt W. Association between freezing agent and acrosome damage of human sepermatozoa from subnormal and normal semen. Andrologia. 2001;33:331-336.##Baratz S.L., Rothschild E., Grach B., Koifman M., Shiloh H., Ishai D. Dirnfeld M. The value of sperm pooling and cryopresenvation in patients with transi-ent azoospermia or sever oligoasthenoteratozoosper-mia. Hum Reprod.2002;17(1):157-160.##McLaughlin E.A., Ford W.C.L., Hull M.G.R. A com-parison of the freezing of human semen in the uncircu-lated vapour above liquid nitrogen and in a comer-cial semi programmable freezer. Hum Reprod.1990;5:724-8.##Ragni G., Caccamo A.M., Dalla Serra A., Guercilena S. Computerized slow staged freezing of semen from men with testicular tumors or Hodgkin’s disease prese-rves sperm better than standard vapor freezing. Fertil Steril.1990;53: 1072-5.##Thachill J.V., Jewett M.A.S. Preservation techniques for human semen. Fertil Steril.1981; 35:546-8.##Critser J.K., Kuse Benda A.R., Aaker D.V., Arneson B.W., Ball G.D. Cryopreservation of human spermato-zoa III. The effect of cryoprotectants on motility. Fertil Steril.1988;50:314-20.##Serafini P., Mars R.P. Computerized stage-freezing technique improves sperm survival and preserve pene-tration of zona-free hamster ova. Fertil Steril.1986;45: 854-858.##Critser J.K., Arenson B.W., Aaker D.V., Huse-Benda A.R., Ball G.D. Cryopreservation of human spermatozoa II. Postthaw chronology of motility and of zona-free hamster ova penetration. Fertil Steril.1987;47:980-984.##Tulandi T., McInnes R.A. Vaginal Lubricant: effect of glycerol and egg white on human sperm motility and progression in vitro. Fertil Steril 1984;41:151-153.##Weidel L., Prins G.S. Cryopreservation of human spermatozoa frozen in eight different buffer system. J Androl.1987;8:41-47.##Watson P.F. The preservation of semen in mammals. In: Oxford reviews of reproductive biology. Finn CA (Eds) Oxford University Press, Oxford.1979;pp:283-350.##Gao D.Y., Ashworth E., Watson P.F. Hypersmotic tole-rance of human spermatozoa: separate effects of glyce-rol, sodium chloride and sucrose on spermiolysis. Biol Reprod.1993;49:112-113.##Jezek D., Schulze W., Kalanj-Bognar S., Vukelic Z., Milavec-Puretic V., krhen I. Effects of various cryo preservation media and freezing thawing on the morphology of rat testicular biopsies. Andrologia.2001; 33:368-378.##Sawada Y. preservation of human semen by deep freezing. Int J Fert.1964;9:525-532.##Sawada Y., Ackerman D.R. Use of frozen semen. In: S.J. Behrman and R.W. kistner (Editors) progress in infertility. Boston: little Brown.1968;pp:731-748.##Jeyendran R.S., Graham E.F. An evaluation of cryo-protective compounds on bovine spermatozoa. Cryo-biology.1980;17:458-464.##Polge C. Freezing of spermatozoa. In: Ashwood Smith and J. Farrant (Eds): Low temperature presser-vation in medicine and biology. Bath: Pitman.1980; pp:45-64.##Richardson D.W. Techniques of sperm storage. In: Artificial insemination. R.C.O.G., London.1976;pp:97-125.##Mann T. Biochemistry of semen and of the male reproductive tract. London. Methuen. (2nd Edition).1964.##Graham E.F., Crabo B.E., Brown K.L. Effect of some zwitterions buffers on the freezing and storage of sper-matozoa. J Dairy Sci.1972;55:372-8.##Mc Gonagle L.S., Goldstein M., Feld schuh J. Foote R.H. The influence of cryprotective media and processing procedures on motility and migration of frozen thawed human sperm. Asian J Androl.2002; 4:137-141.##Sherman J.K. Cryopreservation of human semen. In: Keel B.A., Webster B.W. (Editors); CRC Handbook of the laboratory Diagnosis and Treatment of infertility CRC press. Boca Raton, FL.1990.##Emmens. C.W., Blackshaw A.W. Artificial insemina-tion. Physiol Rev.1971;36: 227-306.##Luyet B., Masat R. On the cryoprotective action of albumin on erythocytes. Cryobiology. 1967;3:370.##Glaub J.C., Milis R.N., Katz D.F. Improved motility recovery of human spermatozoa after freeze preserva-tion via a new approach. Fertil Steril.1976;27:1283-1291.##Katayama K.S., Stehlik E., Roesler M., Jeyedran R.S., Holmgren W.J., Zaneveld L.J. Treatment of human spermatozoa with an egg yolk medium can enhance the outcome of in vitro fertilization. Fertil Steril.1989; 52:1077-1079.##Barak Y., Amit A., Lessing J., Paz G., Homonnai Z., Yogev L. Improved fertilization rate in an in vitro fertilization program by egg yolk-treated sperm. Fertil Steril.1992;58:197-198.##McCoshen J.A., Wodzicki A., Tyson J.E. Effectiveness of human semen frozen in TESE-yolk- buffered medium on AID outcome. Fertil Steril.1984;42:164.##Griffin J.E.T., Nunn W.R., Hartigen P.J. An immune response to egg yolk semen diluent in dairy cows. J Reprod Fert.1971;25:193-199.##Park Y.W, Hunter A.G. Effect of repeated inseminations with egg yolk semen extender on fertility in cattle. J. Dairy. Sci.1977;60:1645-1649.##Jondet M. Congelation du sperme humain. Bull Acad Vet.1976;49:373-384.##Foote R.H. Fertility of bull semen at high extension rates in Tris buffered extenders. In: Reproduzione animale e fecondazione artificiale. Bologna: Edizione Agricole. 1972;pp:99-105.##Van den Berg L., Rose D. Effect of freezing on the pH and composition of sodium and potassium phosph-ate solution: the reciprocal system KH2PO4- Na2HPO4-H2O. Arch Biochem Biophys.1959;81:319-329.##

بررسي تغييرات استرس اكسيداتيو ناشي از تيمارهاي جيوه و نيكوتين دراسپرم گاو: تعديل توسط منگنز و آلبومين Mercury and Nicotine-induced Oxidative Stress Changes in Bull Spermatozoa: Modulation by Manganese and Albumin 2 1 زمينه و هدف: يكي از عوامل مهمي كه نقشي شاخص در ناباروري مردان ايفاء مي‌كند، فرآيند استرس اكسيداتيو يا افزايش غيرطبيعي راديكال‌هاي آزاد در محيط است كه در بيشتر موارد اثرات منفي بر روند توليدمثل افراد بر جاي مي‌گذارد. در پژوهش حاضر نيز تغييرات احتمالي استرس اكسيداتيو ناشي از اثرات جيوه (M600 وM1200) به عنوان يون فلزي با توزيع فراوان در محيط و نيكوتين (M75 /0) به عنوان يك آلكالوييد مهم در دود سيگار، در محيط آزمايشگاه بر ساختار بيوشيميايي غشاء (پراكسيداسيون چربيها، LPO )، ميزان گلوتاتيون (GSH)، قدرت تحرك و واكنش آكروزومي سلول‌هاي اسپرم گاو در حضور و بدون حضور تركيبات منگنز و آلبومين سرم گاو (BSA) بررسي گرديد. روش بررسي : سنجش ميزان پراكسيداسيون چربي هاي غشاء به كمك اندازه گيري غلظت MDA توليد شده در محيط انجام شد. غلظت گلوتاتيون احياء شده (GSH) با اندازه گيري ميزانDTNB احياء شده، و واكنش آكروزومي نيز با به كارگيري روش هضم ژلاتين مورد سنجش قرار گرفتند. درصد سلول هاي متحرك و غيرمتحرك به كمك ميكروسكوپ فاز كنتراست و در حرارت اتاق طي مدت 120 دقيقه و با فواصل زماني يك ساعته، شمارش گرديدند. ارزيابي آماري به كمك نرم افزارSPSS و با استفاده از آزمون t انجام گرفت. مقدار05/0p< نيز از نظرآماري معني دار در نظرگرفته شد. نتايج: در اين پژوهش افزودن جيوه و نيكوتين موجب افزايش معني‌داري در ميزان LPO (01/0p<) محيط حاوي اسپرم گرديد. علاوه بر اين، تيمارهاي جيوه و نيكوتين موجب كاهش معني‌داري در ميزان غلظت GSH، قدرت تحرك (در فواصل زماني مختلف) و درصد واكنش‌هاي آكروزومي (كاهش درصد هاله‌ها) اسپرم‌هاي گاو گرديدند. در مقابل، كاربرد تركيبات منگنز و آلبومين باعث معكوس‌سازي اين روندها شد. در اين قسمت منگنز به عنوان يون برتر و با نتايج مطلوب‌تر عمل نمود. با توجه به اين نتايج آلبومين در همراهي با غلظت‌هاي زياد از يون‌هاي فلزي واجد خاصيت پرواكسيداني گرديده، كه نتيجه آن ناتوان‌سازي هر چه بيشتر اسپرمها (افزايشLPO و كاهش GSH (01/0(p<، كاهش واكنش آكروزومي (001/0p<) و كاهش در ميزان قدرت تحرك در فواصل زماني مختلف) بود. نتيجه‌گيري: براساس نتايج مطالعه حاضر جيوه و نيكوتين قادر به القاء ناباروري در اسپرم مي‌باشند و اين دو، اثرات خود را از طريق تغيير در برخي پارامترهاي بيوشيميايي وفيزيولوژيكي اسپرم نظير ساختار غشاء و ميزان قدرت تحرك، اعمال مي‌كنند. علاوه بر اين آنتي‌اكسيدانها (به ويژه آلبومين) را مي‌توان به عنوان تيغ دو لبه‌اي در نظر گرفت كه گاه پس از كاربرد، اثرات ناخواسته و منفي از خود بروز مي‌دهد. 2 Introduction: Oxidative stress (OS) is an important factor in the etiology of male infertility which presents abnormal increase in the production of free radicals with negative influences on reproduction. The aim of present study is evaluation effect of mercury (Hg) (600& 1200 micro molar) and nicotine (0.75 mM), in vitro, on membrane integrity (LPO), GSH content, motility, and acrosome reaction of bull spermatozoa with/ without manganese (Mn) and albumin (BSA). Materials and Methods: Lipid peroxidation (LPO) was assessed by measurement of MDA levels. Reduced glutathione (GSH) content evaluated by levels of reduced DTNB and acrosome reaction evaluated by gelatin digestion test. Sperm motility was assessed by under phase contrast micro-scopy at room temperature until 120 min. Statistical analysis performed using SPSS software by t- test, at p<0.05 significance level. Results: Our results showed that addition of Hg and nicotine to the sperm samples resulted in elevation of LPO rate (p<0.001). Meanwhile, Hg and nicotine treatments caused a significant reduction in the GSH content, motility, and acrosome reaction of bull sperm cells. Concomitantly, there was also an improvement in the mentioned altered processes following albumin and manganese addition. Here, Mn had better results than BSA. We found that BSA act as a pro-oxidant when added to medium containing high concentrations of metal ions, imposing more deleterious effects on bull spermatozoa [more increase in the LPO and decrease in GSH level (p<0.01), decreased acrosome reaction (p<0.001) and dropped motility]. Conclusion: According to our results, Hg and nicotine may impose sperm dysfunction in bull spermatozoa via altering some biochemical and physiological aspects of sperm like membrane integrity and cell movement. Our data suggest BSA and Mn that involved in antioxidant capacity are as double-edged swords (particularly BSA), which may show unwanted and negative effects. 153 163 Mehran M Arabi مهران عربی Biology Department, Faculty of Sciences, Shahr Kord University Biology Department, Faculty of Sciences, Shahr Kord University Iran mehranarabi@hotmail.com Ahmad Ali AA Mohammadpoor احمدعلی محمدپور Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord University Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord University Iran SpermatozoaMercuryNicotineManganeseAlbuminOxidative stressMotilityAcrosome reactionGSHAntioxidant 183.pdf Agarwal A., Saleh R.A., Bedaiwy M.A. Role of rea-ctive oxygen species in the pathophysiology of human reproducetion. Fertil Steril.2003;79:829-843.##عربی مهران، راویندر آناند. تاثیر نیکوتین بر اسپرم افراد نورمواسپرمیک: تعدیل توسط آنتی‌اکسیدانها. فصلنامه باروری و ناباروری،سال سوم،شماره یازدهم، تابستان1381،صفحات22-11.##Arabi M., Sanyal S.N., Kanwar U., Anand, R.J.K. The Effect of antioxidants on nicotine and caffeine induced changes in human sperm-An in vitro Study. In: Male fertility and lipid metabolism. Editors. De Vriese S.R., Christophe A.B.), Chapter 16, Published by AOCS Press, USA.2003;pp:250-267.##Arabi M. Nicotinic infertility: assessing DNA and plasma membrane integrity of human spermatozoa. Andrologia.2004;36(5):305-310.##Arabi M. Analysis of impact of metal ion contamina-tion on Carp (Cyprinus carpio L). Biol Trace Elem Res. 2004;100(3):229-246.##Aitken R.J., Clarkson J.S., Fisher S. Generation of rea-ctive oxygen species, lipid peroxidation and human sperm function. Biol Reprod.1989;40:183-197.##Iwasaki A., Gagnon A. Formation of reactive oxygen species in spermatozoa of infertile patients. Fertil Steril.1992;57:409-416.##Agarwal A., Allamaneni S.S., Nallella K.P., George A. T., Mascha E. Correlation of reactive oxygen species levels with the fertilization rate after in vitro fertili-zation: a qualified meta-analysis. Fertil Steril.2005;84 (1):228-231.##Sikka S.C. Oxidative stress and role of antioxidants in normal and abnormal sperm function. Front Biosci. 1996;1:78-86.##Depuydt C.E., Bosmans E., Zalata A., Schoonjans F., Comhaire F. The relation between reactive oxygen spe-cies and cytokines in andrological patients with or without male accessory gland infection. J Androl.1996; 17:699-707.##Halliwell B., Gutteridge J.M.C. Free radical in biolo-gy and medicine. 2nd Edition, Published by Clarendon Press, Oxford.1989;pp:372-390.##Kankofer M., Kolm G., Aurich J., Aurich C. Activity of glutathione peroxidase, superoxide dismutase and catalase and peroxidation intensity in stallion semen during storage at 5 degrees C. Theriogenology.2005; 63(5):1354-1365.##Aitken R.J., Harkiss D., Bukingham D. Relationship between iron-catalyzed lipid peroxidation potential and human sperm function. J Reprod Fertil.1993;98:257-265.##Fiscor G., Ginsberg L.C., Oldford G.M., Snoke R.E., Becker R.W. Gelatin-substrate film technique for detec-tion of acrosin in single mammalian sperm. Fertil Steril. 1983;30:543-552.##Sedlak J., Lindsay R.H. Estimation of total, protein-bound and non- protein sulfhydryl groups in tissue with Ellman’s reagent. Anal Biochem. 1968;25:192-205.##Verma A., Kanwar K.C. Human sperm motility and lipid peroxidation in different ascorbic acid concentra-tions: an in vitro analysis. Andrologia.1998;23:325-29.##Sharma R.K., Agarwal A. Role of reactive oxygen species in male infertility. J Urol.1996;48:835-850.##Crinnion W.J. Environmental medicine, part three, Long-term effects of chronic low dose mercury expo-sure. Altern Rev Med.2000;5:209-223.##Schurz F., Sabater-Vilar M., Fink-Gremmels J. Mut-agenicity of mercury chloride and mechanisms of cellular defence: the role metal-binding proteins. Mutage-nesis. 2000;15(6):525-530.##Rao M.V., Sharma P.S. Protective effect of vitamin E against mercuric chloride reproductive toxicity in male mice. Reprod Toxicol.2001;15:705-712.##Araragi S., Kondoh M., Kawase M., Saito S., Higash-imoto M., Sato M. Mercuric chloride induces apoptosis via a mitochondrial-dependent pathway in human leukemia cells. Toxicology.2003;184:1-9.##Sener G., Sehirli A.O., Ayanoglu-Dulger G. Melatonin protects against mercury (II)-induced oxidative tissue damage in rats. Pharmacol Toxicol. 2003;93:290-296.##Shinada M., Takizawa Y., Muto H. Effect of mercuric chloride on phospholipid peroxidation in rat. Nippon Koshu Eisei Zasshi.1990;37(12): 1010-1014.##Delnomdedieu M., Allis J.W. Interaction of inorganic mercury salts with model and red cell membrane: im-portance of lipid-binding sites. Chem Biol Interact.1993; 88:71-87.##Marchi B., Burlando B., Moore M.N., Viarengo A. Mercury and copper-induced lysosomal membrane destabilisation depends on [Ca2 ]i dependent phosphor-lipase A2 activation. Aquat Toxicol.2004;66:197-204.##Lund B.A., Miler D.M., Woods J.S. Mercury-induced H2O2 formation and lipid peroxidation in vitro in rat kidney mitochondria.Biochem Pharmacol.1991;42:181-187.##Nath K.A., Croatt A.J., Likely S., Behrens T.W., Warden D. Renal oxidant injury and oxidant response induced by mercury. Kidney Int.1996;50:1032-1043.##Ariza M.E., Bijur G.N., Williams M.V. Lead and mer-cury metagenesis: Role of H2O2, superoxide dismutase, and xanthine oxidase. Environ Mol Mutagen.1998;31: 352-361.##Halliwel B., Gutteridge J.M.C. Oxygen toxicity, oxy-gen radicals, transition metals and disease. Biochem J. 1984;219:1-14.##Cope G.F. The in vitro effects of nicotine and cotinine on sperm motility. Hum Reprod.1998;13:777-778.##Wetscher G.J., Bagchi M., Bagchi D., Perdikis G., Hinder P.R., Glaser K., Hinder R. Free radical production in nicotine treated pancreatic tissue. Free Radic Biol Med.1995;18:877-882.##Yuli I., Wilbrandt W., Shinitzky M. Glucose transport through cell membrane of modified lipid fluidity. Biochemistry.1981;20:4250-4257.##Meister A., Anderson M.E. Glutathione. Ann Rev Biochem.1983;52:711-760.##Elia A.C., Galarini R., Taticchi M.I., Dorr A.J., Man-tilacci L. Antioxidant responses and bioaccumulation in Ictalurus melas under mercury exposure. Ecotoxicol Environ Saf.2003;55:162-167.##Hultberg B., Anderson A., Isaksson A. Interaction of metals and thiols in cell damage and glutathione distri-bution: potentiation of mercury toxicity by dithiothrei-tol. Toxicology.2001;156: 93-100.##Lissak A., Wiener-Megnazi Z., Reznick A.Z., Shnizer S., Ishai D., Grach B., Lahav-Baratz S., Shiloh H., Koi-fman M., Dirnfeld M. Oxidative stress indices in semi-nal plasma, as measured by the thermocheminesce-nce assay, correlate with sperm parameters. Fertil Steril. 2004;81(suppl.1):792-797.##Bilodeau J.F., Blanchette S., Cormier N., Sirard M.A. Reactive oxygen species-mediated loss of bovine sperm motility in egg yolk Tris extender: protection by pyru-nate, metal chelators and bovine liver or oviduvtal fluid catalase. Theriogenology.2002;57(3):1105-1122.##Woo A.L., James P.F., Lingrel J.B. Sperm motility is dependent on a unique isoform of the Na, K-ATPase. J Biol Chem.2000;275:20693-20699.##Au D.W., Chiang M.W., Wu R.S. Effects of cadmium and phenol on motility and ultrastructure of sea urchin and mussel spermatozoa. Arch Environ Cont Toxicol. 2000;38(4):455-463.##Tien M., Bucher J.R., Aust S.D. Thiol-dependent lipid peroxidation. Biochem. Biophys Res Commun.1982;107(1):279-285.##

بررسي ميزان تخمك‌هاي نابالغ در سيكل‌هاي كمك باروري (ART) Complete Oocyte Maturation Arrest in ART Cycles 2 1 زمينه و هدف: در سيكل‌هاي كمك باروري (ART) جهت افزايش احتمال لقاح و بارداري، به كمك هورمون‌هاي تحريك تخمك‌گذاري تعداد تخمك‌هاي بالغ متافاز دو (MII‌) افزايش مي‌يابد. براساس مطالعات موجود نارس بودن تمام تخمك‌ها یا توقف كامل رشد تخمك (COMA) در سيكل‌هاي ART بسيار نادر است. هدف اين مطالعه گذشته‌نگر بررسي سيكل‌هاي ART با COMA به همراه نتايج درماني اين بيماران در مراجعه‌كنندگان به مركز درمان ناباروري يزد بود. روش بررسي: از كل پرونده‌هاي بيماران نابارور مراجعه‌کننده به مرکز درمان ناباروری یزد طي سال‌هاي 82-1380، تعداد 38 زوج با مشكل COMA مشخص شد و وضعيت سن، روش تحريك تخمك‌گذاري، تعداد فوليكول و تخمك، مورد مطالعه قرار گرفت. تحريك تخمدان به سه روش كوتاه مدت، طولاني مدت و HMG/HCG براي سه گروه انجام شد. همچنين نمونه‌ها با توجه به علت ناباروري به سه گروه فاكتور زنانه، مردانه و نامشخص تقسيم شدند. نتايج: نتايج نشان داد كه از 38 زوج فوق، به ترتيب 17 و 7 نفر جهت درمان ناباروري در سيكل‌هاي دوم و سوم خود مراجعه نموده بودند. ميانگين سن مرد و زن به ترتيب 3/3±2/34 سال و 1/3±4/29 سال بود و اكثر زوجين (22 مورد) داراي ناباروري با فاكتور زنانه بودند. از اين ميان 21 نفر از خانمها زير 35 سال و بقيه در محدوده سني 41-35 سال بودند. در سيكل‌هاي دوم و سوم درمان، ميانگين تعداد تخمك نارس (MI و GV) به ازاي هر سيكل از ميزان 8/2±78/2 به 5/1±13/3 و 96/0±90/2 تغيير يافت. همچنين به ازاي هر سيكل ART ميزان تخمك MII از صفر در دفعه اول درمان به 06/2 و 02/2 در دفعات بعدي افزايش معني‌دار داشت. پروتكل HMG/HCG ارتباط مستقيم با كاهش تعداد تخمك نارس در مقايسه با ديگر روش‌هاي تحريك تخمك‌گذاري داشت. همچنين افزايش سن زن در ارتباط با افزايش تعداد تخمك نارس (MI وGV) بود. نتيجه‌گيري: به‌طور كلي نتايج نشان داد كه شيوع COMA در بيماران نابارور مراجعه کننده به مرکز ناباروری یزد بسيار بالاست و از جمله عوامل دخيل احتمالاً افزايش سن زن مي‌باشد. با توجه به بهبود نتايج كيفيت تخمك در دفعات بعدی درمان به نظر مي‌رسد كه در بعضي موارد عوامل خارجي نظير نوع دارو و شركت سازنده دارو، پروتكل تحريك تخمداني، طرز تهيه و نگهداري دارو و بالاخره دقت بیمار در انجام تزريقات از جمله موارد دخيل در COMA مي‌باشد. 2 Introduction: In assisted reproductive techniques (ART), ovarian hyperstimulation drugs are used to retrieve several mature oocytes. International studies report that complete absence of MII oocytes known as “complete oocyte maturation arrest (COMA)” is a very rare phenomenon. The main objective of this retrospective study was to evaluate the ART cycles with COMA along with results from the subsequent treatment cycles. Materials and Methods: A total of 38 cases with COMA were evaluated for age of patients, ovulation induction protocols, and number of follicles and oocytes (GV & MI). Three different protocols of short, long and HMG/HCG were administered on patients. Also, type of infertility was divided into male, female and unexplained. Results: The results showed that out of 38 cases, 17 and 7 of the couples were respectively retu-rned for the subsequent treatment cycles. The mean of age for men and women was 34.2+3.3 and 29.4+3.1, respectively.Also, the majority were diagnosed with female factor infertility (22 cases). 21 women were under 35 years old and the rest were between ages of 35-41. In second and third treatment cycles, the mean number of immature oocyte (GV+MI) was 3.13+1.5 and 2.9+0.96, respecttively. In addition mean number of MII oocytes were increased from 0 in first to 2.06+1.3 in second and 2.02+0.7 in third cycles. HMG/HCG protocol was in direct relation with the lowest rate of immature egg retrieval. The results also showed that older women (>35) had the highest rate of immature oocytes. Conclusion: the results indicate that the prevalence of COMA is very high in our patients which could be related to the women’s age. However, the COMA was reduced in patients who were re-turned for the second or third times for ART treatments. This may show that extrinsic factors related to the ovulation induction protocol and Induction drugs such as the type, manufacturing company, purchasing, and preservation could be the main cause in COMA taking place in some of our cases. 163 171 Fatemeh F Haji- Maghsoudi فاطمه حاجی مقصودی Department of Anatomy, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences Department of Anatomy, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences Iran Mohammad Ali MA Khalili محمد علی خلیلی Infertility Research and Clinical Center, Shahid Sadoughi Medical Sciences University Infertility Research and Clinical Center, Shahid Sadoughi Medical Sciences University Iran Khalili59@hotmail.com Abbas A Aflatoonian عباس افلاطونیان Department of Obstet . and Gynecol . of Shahid Sadughi Medical Science of Yazd Department of Obstet . and Gynecol . of Shahid Sadughi Medical Science of Yazd Iran InfertilityAssisted Reproductive TechniquesOvarian stimulationImmature oocyteOocyte maturation arrest 184.pdf Byskov A.G., Anderson C.Y., Leonardsen L. Role of meiosis activating sterols, MAS, in induced oocyte maturation. Mol Cell Endocrinol.2002;87:189-96.##Kubota Y., Takisawa H. Block to DNA replication in meiotic maturation: a unified view for a robust arrest of cell cycle in oocytes and smotic cells. Biossays. 2003;25:313-6.##Van Steirteghem A.C., Nagy Z., Joris H., Liv J., Staessens C., Smits J. High fertilization and implanta-tion after intracytoplasmic sperm injection. Hum Rep-rod.1993;8:1061-6.##Rudak E., Dor J., Kimchi M., Goldman B., Levran D., Mashiach S. Anomalies of human oocytes from infer-tile women undergoing treatment by in vitro fertiliza-tion. Fertil Steril.1990;54:292-6.##Hartshorne G., Montgomery S., Klenzeris L. A case of failed oocyte maturation in vivo and in vitro. Fertil Fertil Steril.1999;71:567-70.##Harrison K.L., Sherrin D.A., Keeping J.D. Repeated oocyte maturation block. J Assisted Reprod Genet. 2000;17:231-3.##Levran D., Ferhi J., Nahum H., Glezerman M., Weissman A. Maturation arrest of human oocytes as a cause of infertility. Hum Reprod.2002;17: 1604-9.##Detwiler M.R., Reuben M., Lix, Rogers E., Lin R. Two zinc finger proteins, OMA-1 and OMA2, are redund-antly required for oocyte maturation in C elegans. Dev cell.2001;1: 187-99.##Hartshorne G., Montagomery S., Klentzeris L. A case of failed oocyte maturation in vivo and in vitro. Fertil Steril.1999;71:567-70.##Kotsuji F., Kubo M., Tominaga T. Effect of interaction between granulosa and thecal cells on meiotic arrest in bovine oocytes. J Reprod Fertil.1994;100:151-6.##Zhang X., Zerafa A., Wong J., Armstrong D.T., Khamsi F. Human menopausal gonadotropin during in vitro maturation of human oocytes retrieved from small follicles enhanced in vitro fertilization and cleavage rats. Fertil Steril.1993;59:850-3.##Dandekar P.V., Martin M.C., Glass R.H. Maturation of immature oocytes by coculture with granulosa cells. Fertil Steril.1991;55:95-9.##Janssenwillen C., Nagy Z.P., Van Steirtegham A. Maturation of human cumulus-free germinal vesicle stage oocytes to MII by culture with monolayer vero cells. Hum Reprod.1995;10:375-8.##Farhi J., Nahum H., Zakut H., Levran D. Incubation with sperm enhances in vitro maturation of the oocyte from the germinal vesicle to the M2 stage. Fertil Steril.1997;68;318-22.##

بررسی ميزان موفقيت حاملگی در دو روش نزديكي زمان بندي‌شده وتلقيح داخل رحمي اسپرم در بيماران مبتلا به آمنوره هايپوتالاميک مراجعه کننده به مرکز تحقيقات ناباروري وليعصر Pregnancy success rate in timed intercourse and intrauterine insemination in patients with hypothalamic amenorrhea 2 1 زمينه و هدف: آمنوره هايپوتالاميك يكي از شايع‌ترين اشكال عدم تخمك‌گذاري است كه در آن كمبود ترشح ضرباني GnRH ديده می‌شود. در صورت رد علل تخمداني و هيپوفيزي عدم تخمك‌گذاري اين تشخيص مطرح مي‌شود. شايع‌ترين نوع آن سركوب عملكرد توليد مثل است كه اغلب نوعي پاسخ رواني- زيست‌شناختي به حوادث زندگي است و آمنوره هايپوتالاميك عملكردي ناميده مي‌شود. بيماران مبتلا به آمنوره هايپوتالاميك كه خواهان حاملگي هستند بايد تحت تحريك تخمک‌گذاری توسط گونادوتروپين‌هاي اگزوژن و يا GnRH قرار گيرند. GnRH به طور مداوم و به شكل ضرباني توسط يك پمپ كوچك قابل حمل به دو روش داخل وريدي و زيرجلدي تجويز مي‌شود. بسياري از بيماران آن را نامناسب مي‌دانند زيرا مجبور هستند در زمان خواب نيز آن را همراه داشته باشند. متاسفانه در ايران پمپ تجويز GnRH در دسترس نیست و بنابراين جهت القاء تخمک‌گذاری از گونادوتروپين اگزوژن استفاده مي‌شود. پس از تحريك تخمک‌گذاری، بيماران يا توصيه به نزديكي زمان‌بندي شده (TI) و تلقيح داخل رحمي اسپرم (IUI) مي‌شوند و يا تحت لقاح آزمايشگاهي (IVF) و حتي ترزيق داخل سيتوپلاسمي اسپرم ICSI)‌( قرار مي‌گيرند. TI روشي آسان وكم هزينه‌تر نسبت به IUI و IVF است. هدف از اين مطالعه مقايسه ميزان موفقيت حاملگي در دو روش IUI و TI مي‌باشد. روش بررسي: اين مطالعه به صورت گذشته‌نگر روي 36 بيمار مبتلا به آمنوره هايپوتالاميك مراجعه كننده به مرکز تحقيقات ناباروري بيمارستان وليعصر دانشگاه علوم پزشكي تهران در فاصله فروردين 1378 لغايت بهمن 1383 انجام شد. اين افراد بر اساس معيارهاي ورود و خروج، در مطالعه شركت نمودند. افراد پس از تحريك تخمک‌گذاری، توسط يكي از دو پروتكل درماني IUI و TI تحت درمان قرار گرفتند و سپس از نظر ميزان موفقيت حاملگي با هم مقايسه گرديدند. از جمله معيارهای ورود، سن بين 40- 20 سال و اسپرموگرام طبيعي بود. پرونده‌هايی که در آن علت ناباروري، عامل مردانه ذكر شده بود، آنومالی رحمی همزمان و يا انسداد لوله رحمی وجود داشت، از اين مطالعه خارج شدند. روش‌هاي آماري اين مطالعه Unpaired Student t- test و Fisher’s Exact test و نرم افزار مورد استفاده (10.5) SPSS و سطح معني‌داري 05/0P< در نظر گرفته شد. نتايج: در گروه TI از 27 سيكل، 19 مورد حاملگي (37/70%) و در گروه IUI از 29 سيكل، 7 مورد حاملگي (13/24%) اتفاق افتاده است كه اختلاف بين اين دو روش درمانی معني‌دار است (05/0=p). از نظر تعداد سقط، حاملگی خارج رحمی و چندقلويي اختلاف معني‌داري بين دو گروه وجود نداشت. همچنين از نظر مدت زمان ناباروري، ميانگين سن و ساير مشخصات دموگرافيك و زمينه‌اي اختلاف معني‌داري بين دو گروه وجود نداشت. نتيجه‌گيری: نتايج اين مطالعه نشان می‌دهد که روش TI با توجه به سهولت، ارزانی و نياز به تجهيزات کمتر می‌تواند به‌عنوان اولين روش جهت درمان بيماران مبتلا به ناباروري با علت آمنوره هايپوتالاميک مورد توجه قرارگيرد و روش‌های ديگر به عنوان گام‌های بعدی در درمان اين بيماران لحاظ شود. 2 Introduction: Hypothalamic amenorrhea is one of the most prevalent problems leading to anovu-lation which is due to decrease in pulsatile release of GnRH. This diagnosis can be confirmed only after exclusion of ovarian and pituitary causes lead to anovulation. The most prevalent form, which leads to suppress of reproductive physiology is termed functional hypothalamic amenorrhea. It is a kind of psycho-biological answer to events in life. Patients affected with hypothalamic amenorrhea who want to become pregnant must be induced by exogenous gonadotropin or GnRH to ovulate. Continuous and pulsatile forms of GnRH are administerred intra venously or subcutaneously by a portable mini-pump. Most patients consider this method inappropriate because they are obliged to hold a mini-pump with themselves even while they are sleeping. The GnRH pump is not available in Iran. Consequently, exogenous gonadotropin is used for an ovulation induction, then timed intercourse (TI) or intrauterine insemination (IUI) are recommended. More over, In vitro fertiliza-tion (IVF) or even intracytoplasmic sperm injection (ICSI) techniques could be used. TI is an easier and cheaper method in comparison with IVF and IUI. The objective of this study is to compare the pregnancy success rate of the two methods of TI and IUI. Materials and Methods: In this clinically retrospective study, hypothalamic amenorrhea patients referred to infertility clinics of Reproductive Health Research Center, Tehran, Iran. They registered between April 1999 to March 2005 were considered. Patients were selected based on meeting the entrance criteria of this study. TI or IUI, after induction of ovulation was administered and the rate of successful pregnancies was compareed. Among Entrance criteria, age between 20 to 40 years and normal spermogram could be cited. The cases with infertility due to the male factor, uterine anoma-ly and fallopian tube obstruction were excluded. Results: In the TI group, from 27 cycles, there were 19 pregnant women (70.37%). In the IUI group, from 29 cycles, there were seven pregnant women (24.13%). The difference between these two methods was significant (p=0.05). Differences in the number of abortions and ectopic pregnancies between the two groups were not significant. Duration of infertility, mean age, and other demogra-phic characteristic were not significant different factor between the two groups. Conclusion: The results of this study support the TI as the first-line treatment method of hypotha-lamic amenorrhea. Taking into consideration the easy usage, low cost, and lack of demand for equi-pment in this method could be recommended as the first step for treatment of hypothalamic ameno-rrhea's infertile patients. 171 177 Tahereh T Eftekhar طاهره افتخار Vali-e- Asar Reproductive Health Research Center,Tehran Medical Sciences University Vali-e- Asar Reproductive Health Research Center,Tehran Medical Sciences University Iran Shirin Sh Ghazizadeh شیرین قاضی‌زاده Vali-e- Asar Reproductive Health Research Center,Tehran Medical Sciences University Vali-e- Asar Reproductive Health Research Center,Tehran Medical Sciences University Iran shirin_ghazizadeh@yahoo.com Ladan L Kashani لادن کاشانی Department of Obstet . and Gynecol . of Tehran Medical Sciences University .Emam khomayni Hospital، Valiaser Hospital Department of Obstet . and Gynecol . of Tehran Medical Sciences University .Emam khomayni Hospital، Valiaser Hospital Iran Maryam M Bagheri مریم باقری Vali-e- Asar Reproductive Health Research Center,Tehran Medical Sciences University Vali-e- Asar Reproductive Health Research Center,Tehran Medical Sciences University Iran Hypothalamic amenorrheaInfertilityTimed intercourseInsemination 185.pdf Jaffe R.B. Long-term follow up of functional hypoth-alamic amenorrhea and prognostic factors. Obstet Gyn-ecol Sur.2002;57:512-514.##Berga S.L. Functional hypothalamic amenorrhea. Curr Opinion Endocrinol Diabetes. 2001;8: 207-313.##Berek J.S. Novak’s Gynecology. 13th Edition.2002. Lip-pincott Williams and Wilkins. Baltimore, USA.##Speroff L., Glass R.H., Kase N.G. Clinical Gynecologic Endocrinology and Infertility. 6th Edition.1999. Lippincott Williams and Wilkins. Baltimore, USA.##Marshall J.C., Eagleston C.A., McCartney C.R. Hypo-thalamic dysfunction. Molecul Cellul Endocrinol.2001; 183:29-32.##Reame N.E., Sauder S.E., Case G.D. Pulsatile gonodo-tropin secretion in women with hypothalamic ameno-rrhea: evidence that reduced frequency of gonodotro-pin-releasing hormone secretion is the mechanism of persistent anovulation. J Clin Endocrinol Metab.1985; 61:851-858.##Haisnleder D.J., Dalkin A.C., Marshall J.C. Regulation of gonodotropin gene expression. In: Knobil, E., Neill, J. (Eds), The physiology of Reproduction, second ed. Raven Press, New York, NY, p:1793, Chapter 31.##Wolf L.J. Ovulation induction. Clin Obstet Gynecol. 2000;15:902-915.##Gardner D.K., Weissman A., Howles C.M., Shoham Z. Textbook of Assisted Reproductive Techniqucs Labo-ratory and Clinical Perspectives (2nd Edition). 2004. Taylor and Francis.##Dessole S., Germond M., Senn A., Welti H., De Gra-ndi P. Ovulation induction by Pulsatile intravenous administration of Gn-RH to patients with hypothalamic amenorrhea. Minerva Ginecology.1993;45:71-76.##Marci R., Dessole S., Senn A, Grandi P., Germond M. Follow-up of 32 hypothalamo-hypopituritary patients treated with Pulsatile gonodotropin-releasing hormone or human menopausal gonodotropin. Gynecol Endocr-inol.1999;13(6):375-81.##Kesrouani A., Abdallah M.A., Attieh E., Abboud J., Atallah D., Makhoul C. Gonadotropin-releasing horm-one for infertility in women with primary hypothalamic amenorrhea. Toward a more interventional approach. J Reprod Med. 2001;46:23-28.##

بررسی اثر متفورمين در دختران مجرد مبتلا به سندرم تخمدان پلی‌كيستيك Effect of Metformin on single girl with polycystic ovarian syndrome 2 1 زمينه و هدف: سندرم تخمدان پلی‌کيستيک (PCOS) شايع‌ترين اختلال غدد درون‌ريز در زنان می‌باشد. اين سندرم با علائم افزايش هورمون‌هاي آندروژني، عدم تخمک‌گذاری، ناباروري و چاقی مشخص می‌گردد. شناخت مقاومت به انسولين به عنوان يك فاکتور اصلی در پاتوژنز PCOS باعث استفاده وسيع از داروهای پايين آورنده انسولين در درمان اين سندرم شده است. استفاده از متفورمين يکی از دارو‌هايي است که در درمان اين بيماران توصيه مي‌شود. با توجه به اينکه بيماران مبتلا به اين سندرم در دراز مدت دچار عوارضی مانند ناباروري، سرطان اندومتر و پستان و بيماری‌های قلبی- عروقی می‌شوند، ضروری است که مطالعه‌ای جهت بررسی اثر داروهای پايين آورنده انسولين روی اين عوارض انجام شود. هدف اين مطالعه بررسی اثر متفورمين روی پارامترهای بالينی و آزمايشگاهی بيماران مجرد مبتلا به اين سندرم است. روش بررسي: در فاصله زمانی فروردين 1380 تا فروردين 1381، 36 دختر مجرد که شواهد بالينی و سونوگرافی سندرم تخمدان پلی کيستيک داشتند، به روش کارآزمايی بالينی در درمانگاه زنان و مامائي دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتي، درماني بابل مورد بررسی قرار گرفتند. براي اين بيماران متفورمين با دوز mg500 سه بار در روز تجويز شد. آزمايش‌های هورمونی شامل FSH، LH، DHEA، Testosterone، 17OH Progesterone، Estradiol و آزمايشات بيوشيمی شامل TG، Chl، LDL، HDL و همچنين وضعيت کلينيکی بيمار قبل و بعد از درمان بررسی گرديد. سپس اطلاعات با استفاده از آزمون‌های آماری Mc Nemar وPaired T- Test توسط نرم افزار آماری SPSS تجزيه و تحليل گرديد. مقادير P-value کمتر از 05/0 معنی‌دار و بيشتر از 05/0 معنی‌دار در نظر گرفته شد. نتايج: متعاقب درمان با متفورمين کاهش وزن (004/0=P) و BMI (006/0=P) بيماران معنی‌دار بود. پس از درمان، تری‌گليسيريد (03/0=P) و LDL (01/0=P) کاهش و HDL (003/0=P) افزايش يافت. همچنين نتايج مطالعه کاهش معنی‌داری را در سطح LH (006/0=P) و استراديول (005/0=P) و DHEA (001/0=p) و تستوسترون (001/0=p) نشان داد. بهبود آکنه (02/0=p) و هيرسوتيسم (026/0=P) نيز بعد از درمان در اين افراد مشهود بود. نتيجه‌گيري: نتايج مطالعه حاضر اثرات چشمگير متفورمين را در بهبود پارامترهای آزمايشگاهی و علائم بالينی نشان داد. پيشنهاد می‌شود دختران مجرد مبتلا به بيماری PCO تحت درمان اين دارو قرار گيرند. در عين حال لازم است مطالعه طولانی‌‌تری با حجم نمونه بيشتري در مورد اثرات اين دارو انجام شود. 2 Introduction: Polycystic ovarian syndrome (PCOS) is one of the most common endocrine dis-eases in women. This syndrome is characterized by hyperandrogenism, an ovulation, infertility and obesity. The recognition of insulin resistance as a principle factor in the pathogenesis of polycystic ovarian syndrome (PCOS) has lead to the use of insulin-lowering agents, also called’ insulin-sensitizing drugs, for its treatment. The use of metformin in this syndrome is one of the therapeutic option. The patients with this syndrome had long term sequel such as infertility, endometrial and breast cancer and cardio vascular disease, it is necessary to evaluate the effect of metformin on this complication. Materials and Methods: The purpose of this study is to evaluate the role of metformin on clinical and Laboratory finding of single girl with polycystic ovarian syndrome. Between April 2001 to April 2002, 36 single girls who were considered to have clinical and sonographic find-ings of polycystic ovarian syndrome, were studied in Gynecology division of babol university of medical sciences they were treated with metformin 500 mg three times daily Hormonal assay (FSH, LH, DHEA, Testestrone, 17 OH progesterone, Estradiol) and biochemistry assay (TG, Cholestrol, HDL, LDL) and also clinical changes were monitored pre and post treatment. Results: After treatment with metformin significant decrease in weight(p=0.004), BMI (p= 0.006) was seen. After treatment TG(p=0.03), LDL(p=0.01) was lowed and HDL (p=0.003) was increased. Also we find a significant decrease in LH(p=0.006), Estradiol (p=0.005), DHEA (p=0.001) and Testostrone (p=0.001). Conclusion: Our results showed improvement in acne (P=0.02) and hirsotism (P=0.026). Our results showed remarkable effects of metformin in improvement of clinical and laboratory parameters. Therefore research of longer duration for effect of this drug would be necessary. 177 187 Tahereh T Nazari طاهره نظری Department of Obstet . and Gynecol , Yahyanejad Hospital, Babol Medical Sciences University Department of Obstet . and Gynecol , Yahyanejad Hospital, Babol Medical Sciences University Iran nazaritahere@yahoo.com Roya R Bayat رویا بیات Department of Obs &amp; Gyn, Fatemeh Al- Zahra Hospital Department of Obs & Gyn, Fatemeh Al- Zahra Hospital Iran Haydeh H Samiee هایده سمیعی Department of Obstet . and Gynecol , Yahyanejad Hospital, Babol Medical Sciences University Department of Obstet . and Gynecol , Yahyanejad Hospital, Babol Medical Sciences University Iran OvaryMetforminSingle girlHirsotismObesityIrregular menstruationPolycystic ovary syndrome 186.pdf Speroff L., Glass R.H., Kase N.G., Clinical Gyneco-logy Endocrinology and Infertility. 6th LW & W Comp-any.1999;pp:505-10.##MacDougal M.J., Tan S.L., Balen S.H., Jacobs U.S. A controlled study comparing patients with and without polycystic ovaries undergoing in vitro fertilisation. Hum Reprod.1993;8:233-7.##Balen A.H. The pathogenesis of polycystic ovary synd-rome: the enigme unravels. Lancet.1999;354:966-7.##Burghen G.A., Givens J.R., Kitabachi A.E. Correlation of hyperandrogenism with hyperinsulinism in polyc-ystic ovarian disease. J Clin Endocrinol Metab. 1980; 50:113-16.##Dunaif A., Futterweit W., Segal K.R., Dobjansky A. Profound peripheral insulin resistance, independent of obesity, in the polycystic ovary syndrome. Diabetes. 1989; 38:1165-74.##Harris M.I., Hadden W.C., Knowler W.C., Dennentt P.H., Prevalence of diabetes and impaired glucose tol-erance and plasma gucose levels in US population aged 67-74 yr. Diabetes.1987;36:523-34.##Pasquali R., Casimiri F., Venturoli S. Insulin resistance in patients with polycysitc ovaries: its relationship to body weight and androgen levels. Acta Endocrinol. 1983;104.110-116.##Ehermann D., Sturis J., Byrne M.M., Karrison T., Rosenfield R.L., Polonsky K.S. Insulin secretory def-ects in polycystic ovary syndrome. Relationship to insulin sensitivity and family histoty of non-insulin dependent diabetes mellitus. J Clin lnvest.1995;96: 520-7.##Nestler J.E., Jakubowicz D.J. Decreases in ovarian cytochorme P450cl7a activity and serum free restos-terone after reduction of insulin secretion in polycystic ativity and serum free testosterone after feduction of insulin secrerion in polycystic ovary syn? N Engl J Med.1996;335-617-23.##Velazquez E.M., Mendoza S., Hamer T., Sosa F., Glueck C.J. Merformin therapy in polycystic ovary syndrome reduces hyperinstilinemia, insulin resisrance, hyperandrogenemia, and systolic blood pressure, While facilitating normal menses and pregnancy. Metabolism. 1994;43:647-45.##Velazquez E., Acosta A., Mendoza S.G. Menstural Cyclicity after Metromin therapy in polycystic oveary syndrome. Obstet Gynecol.1997;90:392-5.##Crava J.C., Fimbel S., Lejeune H., Cugnardey N., Dechaud H., Pugeat M. Effects of diet and metfromin administration on sex hormone binding globulin, andr-ogens, and insulin in hirsute and obese women. J ClinEndoctinol Metab.1995;80:2057-62##Moghetti P., Gasrello R., Negri C., et al. Merformin effecte on clinical features. Endocrine and merabolic profiles, and insulin sensitivity in polycystic ovary syn-drome: a randomized, double blind, placebo contro-lled 6-month trial. Followed by open, long-term clinical evaluation. J Clin Endocrinol Metab.2000;85: 139-749.##Homburg R. Polycystic ovary syndrome. 2nd Edition. LW & W Company.2001;148.##Nestler J.E., Jakubowicz D.S., Decreases in ovarian cytolhrome p 450 C 17a activity and serum free testes-trone after reduction of insulin secretion in polycyst-icovary syndrome N Engl 3 Med.1996;335:617-623.##Velazquez E., Meudozaos Hamer- T., Metformin The-rapy in polysystic ovary syndrome. Reduces hyper-insulinemia insulin resistance, systolic blood pressure while facilitating normal menses and pregnancy, Meta-bolism.1994;43:647-654.##Casmiri F., Bisscotti M., Gambineri S. Metformin im-proves insulin, body fat distribution, and androgen in obese women with and without the polycystic ovary syndrome. Int J Obestity (suppl 21)561,1997.##Morin- Papunen L., Koivunen R., Ruokenon A. Met-formin therapy improves menstural pattern of endo-crine and metabolic effect in women with polycystic ovary syndrome. Fertil Steril.1998;69:696.##Acbay O., Gondoy S. Can metformin reduce insulin resistance in polycystic ovary syndrome? Fertil Steril. 1998;65:946-949.##Ehrmaun D., Cavaghau M., Imperial J. Effect of met-formin on insulin resistance, action in women with polycystic ovarian syndrome. J Clin Endocrinol Metab. 1997;82:524-530.##Diamanti Kandarakis E., Tsianateli T., Bergiele A. Therupeutic effect of metformin on insulin resistance and hyperandrogenism in polycystic ovary syndrome. Eur J Endocrinol. 1998;138:269-274.##Crave J.C., Fimbels M. Lejelane H. Effect of diet and melformn adminstration on sex hormone-binding glo-bulin, androgens, and insulin in hirsute and obese women. J Clin Endocrinol Metab.1995; 80:2057-2062.##Kelly C.S., Gordon D., The effect of metformin on hirsutism in polycystic ovary syndrome. Eur J Endo-crinol.2002;147(2):217-21.##Kazerooni T., Dehghan-Kooshkyhazi M. Effects of metformin therapy on hyperandrogenism in women with polycystic ovariane syndrome. Gynecol Endoc-rinol.2003; 17(1):51-96.##Barbieri R.L. Metformin for the treatment of poly-cystic ovary syndrome. Obstet Gynecol.2003; 101 (4): 785-93.##Pouloit M.C., Despres S.P., Lemieux S., Moorjani S., Premblay A., Nadeau A. Waist circumference and abd-ominal sagittal diameter: best simple anthropometric indexes of abdominal visceral adipose tissue accumu-lation and related cardiovascular risk in men and momen. Am J cardiol.1994;73:460.##Morin Papunen L., Vauhkonen I., Ruokonen A., Tapa-nainen J.S. Metformin versus ethinyl estradiol cypro-terone Acetate in the treatment of nonobese women with polycystic ovary syndrome. Araudomized study. J Clin Endocrinol Metab.2003;88(1):148-56.##Chou K.H., Capp E., Clinical and endocrine parame-ters in response to metformin in women with poly-cystic ovary syndrome. Horm Metab Res.2003;35(2): 86-91.##Mansfield R., Galea R., Brincat M., Hole D., Mason H. Metformin has direct effects on human ovarian ste-roidogenesis. Fertil Steril.2003; 79(4):956-62.##Vrbikova J., Hill M., Starka L., Vondra K. Prediction of the effect of metformin trearment in patients with polycystic ovary syndrome. Gynecol Obstet Invest. 2002;53(2):100-4.##Kumari A.S., Haq A., Jaya sundaram R. Metformin monotherapy in lean women with polycystic ovary syndrome. Reprod Biomed.2005;10(1):100-4.##

مقايسه اثر مفناميك اسيد و ويتامينE به همراه مفناميك اسيد در ميزان درد ديسمنوره اوليه The comparison of the therapeutic effect of Mefenamic acid and Mefenamic acid plus vitamin E on severity of pain in primary dysmenorrhea 2 1 زمينه و هدف: ديسمنوره يا قاعدگي دردناك يكي از شايع‌ترين بيماري‌هاي زنان است. ديسمنوره اوليه به قاعدگي دردناك درغياب بيماري لگني اطلاق مي‌شود و علت آن انقباضات رحمي حاصل از پروستاگلاندين‌هاي با منشاء اندومتر ترشحي است. درمان متداول آن استفاده از داروهاي ضد التهابي غير استروئيدي و يا داروهاي ضد بارداري خوراكي مي‌باشد. براساس مطالعات موجود، ويتامين E در کاهش شدت درد ديسمنوره اوليه موثر می‌باشد. هدف اين مطالعه مقايسه اثر مفناميک اسيد و ويتامين E به همراه مفناميک اسيد در کاهش شدت درد ديسمنوره اوليه به منظور استفاده در افرادی که كاهش شدت درد در آنها با مفناميک اسيد به حد مطلوب نبود انجام شد. روش بررسي: در اين كارآزمايي باليني دو سوكور که در شهر زاهدان انجام شد 64 زن مجرد كمتر از 30 سال مبتلا به ديسمنوره اوليه مراجعه كننده به درمانگاه بيمارستان قدس زاهدان در سال‌هاي 82 و 83، به صورت تصادفي در دو گروه قرار گرفتند. جهت كاهش درد ديسمنوره به يك گروه در دو قاعدگي متوالي مفناميك اسيد به همراه ويتامين E (10 كپسول حاوي IU400) وبه گروه ديگر مفناميك اسيد و دارونما داده شد، تا براي 5 روز از دو روز قبل تا سه روز بعد از قاعدگي شبي يك كپسول محتوي دارونما و در دو روز اول قاعدگي كپسول mg 250 مفناميك اسيد (ابتدا 2 كپسول با هم و سپس هر 6 ساعت يك عدد) مصرف كنند و مجدداً مراجعه‌ نمايند. شدت درد براساس درك فرد از درد قاعدگي و انتخاب عدد بازگو كنندة آن بر روي يك خط كش mm 100 (VAS) تعيين شد. نتايج با استفاده از آزمون آماري t محاسبه و 05/0p< معني‌دار در نظر گرفته شد. نتايج: آزمون‌های آماري نشان داد كه ميانگين اختلاف شدت درد قبل و بعد از درمان در گروهی که مفناميک اسيد به همراه ويتامين E دريافت کرده بودند 52/17±53/48 در مقياس 100 و در گروهی که مفناميک اسيد و دارونما دريافت کرده بودند 21±94/25 در مقياس 100 بود و کاهش شدت درد در گروهي كه برای آنها مفناميك اسيد و ويتامين E تجويز شده بود بيشتر از گروه ديگر بود (001/0p< ). نتيجه‌گيری: بر اساس نتايج حاصل آن دسته از مبتلايان به ديسمنوره اوليه كه مصرف مفناميك اسيد سبب كاهش درد مطلوب در آنها نمي‌شود تجويز توام مفناميك اسيد و ويتامينE پيشنهاد مي‌شود. 2 Introduction: Dysmenorrhea is one of the most gynecologic problems. Primary dysmenorrhea defines as painful menstruation in the absence of pelvic disease. Prostaglandin released from the endometrium at the time of menstruation causes primary dysmenorrhea. The Frequent treatment in pain relief for primary dismenomhea are taking non steroidal anti inflammatory drugs (NSAIDs) and oral contraceptives. In order to achieve an appropriate pain relief in primary dysmenorrhea in patients who do not have a good response to NSAIDs, this study was designed to compare the therapeutic effect of Mefenamic acid plus placebo with Mefenamic acid plus vitamin E. Materials and Methods: In this double blind clinical trial 64 single girls who were below 30 years old and suffered from primary dysmenorrhea were randomly divided in two groups. In one group Mefenamic acid plus vitamin E and in the other group Mefenamic acid plus placebo were given for their two subsequent menstruations. Results: The results confirm that the mean pain intensity before and after treatment in the group who received Mefenamic Acid and Vit E was (48.53±17.52) and in the group who received Mefenamic Acid and placebo was (25.94±21). Pain relief in the group who received Mefenamic acid and vitamin E was better than the group who received Mefenamic acid and placebo (p<0.001). Conclusion: In patients with primary dysmenorrhea who do not achieve appropriate pain relief with Mefenamic acid, we suggest to intake Mefenamic acid plus vitamin E instead. 187 194 Minoo M Yaghmaei مینو یغمایی Department of Obstet . and Gynecol Department, Faculty of Medicine, Zahedan Medical Sciences University Department of Obstet . and Gynecol Department, Faculty of Medicine, Zahedan Medical Sciences University Iran yaghmaeim@yahoo.com Masoumeh M Mir teimoori معصومه میرتیموری Department of Obstet . and Gynecol Department, Faculty of Medicine, Zahedan Medical Sciences University Department of Obstet . and Gynecol Department, Faculty of Medicine, Zahedan Medical Sciences University Iran Mojgan M Mokhtari مژگان مختاری Department of Obstet . and Gynecol Department, Faculty of Medicine, Zahedan Medical Sciences University Department of Obstet . and Gynecol Department, Faculty of Medicine, Zahedan Medical Sciences University Iran Mehdi M Mohammadi مهدی محمدی Department of Epidemiology &amp; Statistics , Faculty of Health, Zahedan Medical Sciences University Department of Epidemiology & Statistics , Faculty of Health, Zahedan Medical Sciences University Iran Primary dysmenorrheaPainDysmenorrheaMefenamic acidVitamin EProstaglandin 187.pdf The American college of obstetricians and gynecologi-sts. Dysmenorrhea. A COG technical bulletin.1983;63.##Barbieri R.L., Ryan K.J. Menstrual cycle. In: Ryan K. J., Berkowitz R.S., Barbieri R.L., Dunaif A., Kistner’s Gynecology and women’s Health 7th Edition, Published by Mosby, st. Louis.1999;pp:52-54.##Klein J.R., Litt I.F. Epidemiology of adolescent dys-menorrheal. Pediatrics.1981;68:661.##Speroff I., Glass R.H., Kase N.G. Clinical Gynecologic Endocrinology and Infertility. 6th Edition, Published by Lippincott Williams and wilkins, Baltimore.1999;PP: 566-567.##Jolin J.A., Rapkin A. Pelvic pain and dysmenorrhea. In: Berek J.S., Rinehart R.D., Adams Hillard P.J., Adashi E.Y. Novak’s Gynecology 13th Edition, Published by Lippincott Williams and wilkins, Philadelphia.2002;pp: 431-435.##Hestla J.S. Dysmenorrhea. In: Carpenter S.K., Rock J. A., Pediatric and adolescent Gynecology, 2ed Edition, Philadelphia.2002; pp:225.##Lipscomb G.H. Dysmenorrhea and pelvic pain. In: Moghissi K.S., Munkarah A.R., Practical strategies in Obstetrics and Gynecology, W. B. Saunders company, Philadelphia.2000;pp:41.##Dawood M.Y. Dysmeorrhea. Published by Williams and wilkins, Baltimore.1981;pp: 166-167.##Eldering J.A, Nay M.G, Hoberg L.M, Longcope C., McCracken J.A. Hormonal regulation of prostaglandin in production by Rhesus monkey endometrium. J Clin Endocrinol Metab.1990;71:596.##Ziaei S., Faghihzadeh S., Sohrabvand F., Lamyian M., Emamgholy T. A randomized placebo- controlled trial to determine the effect of vitamin E in treatment of primary dysmenorrheal. BJOG.2001;108:1181-1183.##Clement S., Tasinato A. Boscoboinik D., Azziz A., The effect of alpha- tocopherol on the synthesis, phos-phorylation and activity of protein kinase C in smooth muscle cells after phorbol-12- myristate -13- acetate down-regulation. Eur J Biochem.1997;246:745-9.##Apps D.K., Cohen B.B., Steel C.M. Biochemistry, Published by W.B. Saunders, London.1992;pp:314.##Kappus H., Diplock A. Tolerance and safety of vitamin E: a toxicological position report. Free Rad Biol Med. 1992;13:55-74.##Papas A.M. Vitamin E: Tocopherols and Tocotrienols. In: Papas M.P., Antioxidant status, diet, nutrition, and Health, Published by CRC Press, Boca Raton.1999;pp: 202-204.##Ellsworth A.J., Witt D.M., Dugdule D.C., Oliver L.M. Mosby’s Medical Drug Reference, Mosby.1999;450.##Sweetman S.C., Blake P.S., McGlashan J.M., Parsons A.V., et al. Martindale The complete drug reference, London.2002;pp: 1393-1395.##Desai D.I. Assay methods. In: Machlin L.J., Vitamin E: A Comprehensive Treatise, Published by Marcel Dekker, Inc. New York. 1980;pp:102-104.##Guyton A.C., Hall J.E. Text book of Medical Physio-logy, Published by W.B. Saunders Company, Philadel-phia.1996;pp: 899.##Olsen J.A., Leveridge N., Duthie G.G., Shearer M.J. Fat-soluble vitamins. In: Garrow J.S., James w.p.T., Ralph A. Human Nutrition and Dietetics.pp:229-236.##Speroff L., Glass R.H., Kase N.G. Clinical Gynecolo-gic Endocrinology and Infertility, 6th Edition, Publish-ed by Lippincott Williams and wilkins, Baltimore. 1999;pp:308.##Dayong W.U., Mura Casilda, Alison A., et al. Age associated increase in PGE2 synthesis and Cox activity in murine macrophages is reversed by vitamin E. The American physiology society.1996;1585-1588.##Kanno T., Utsumi T., Kobuchi H., Inhibitation of sti-mulus specific neutrophil superoxide generation by alpha- tocopherol. Free Radic Res.1995;431:22.##Azziz A., Boscoboinik D., Hensey C., The protein kin-ase C family. Eur J Biochem. 1992;208:547.##Pryor A.W., Cornicelli J.A., Devall L.J., Tait B. A. rapid screening test to determine the antioxidant poten-cies of natural and synthetic antioxidants. J Org Chem. 1993;58:3521.##

رابطه بين عزت نفس و منبع كنترل با استرس ناباروري زنان و مردان نابارور The relationship between self esteem and locus of control with infertility related stress of no related infertile men and women 2 1 زمينه و هدف: همانگونه كه پديدة ناباروري تحت تأثير عوامل فيزيولوژيك به وجود آمده و در قلمرو علوم پزشكي قرار مي‌گيرد، داراي جنبه‌هاي رواني- ‌اجتماعي بوده و در قلمرو علوم رفتاري و اجتماعي نيز قرار مي‌گيرد. اكنون مطالعات رو به گسترشي وجود دارد كه نشان داده‌اند كه عوامل روانشناختي مي‌توانند هم در ايجاد ناباروري دخالت داشته باشند و هم اينكه ناباروري مي‌تواند پيامدهاي روانشناختي بسياري را با خود به همراه داشته باشد؛ از جمله اين مؤلفه‌هاي روانشناختي، مي‌توان از استرس ناباروري، كنترل دروني – بيروني و عزت نفس نام برد. پژوهش حاضر در نظر دارد ضمن بررسي ارتباط خرده مقياس‌هاي منبع كنترل (دروني بودن،‌ شانس و اعتقاد به قدرتمندي ديگران) و عزت نفس با استرس ناباروري با مؤلفه‌هاي (ارتباطي، جنسي،‌ اجتماعي، ‌سبك زندگي بدون فرزند و نياز به والد بودن) ارتباط استرس كلي با عامل جنسيت را مشخص نمايد. روش بررسي:30 زن و 30 مرد نابارور بدون ارتباط همسري با عامل ناباروري زنانه يا مردانه با تكميل پرسشنامه‌هاي عزت نفس روزينبرگ (1989)، منبع كنترل دروني- بيروني لونسون (1975) و پرسشنامه استرس ناباروري نيوتن و همكاران (1999) در اين پژوهش شركت كردند. تمامي افراد مورد مطالعه از مراجعين به كلينيك ناباروري رويان جهت درمان ناباروري و به روش نمونه‌گيري تصادفي منظم در فاصله تابستان تا زمستان 1382 انتخاب شدند. جهت آناليز داده‌ها از نرم افزار آماري SPSS استفاده و 05/0p<به عنوان سطح معني‌داري در نظر گرفته شد. نتايج: براساس نتايج تحقيق، بين عزت نفس و تمامي مؤلفه‌های استرس ناباروري (جنسي، ارتباطي- اجتماعي وسبك زندگي بدون فرزند و نياز به والد بودن) رابطه معكوس و معني‌داري (05/0p<) وجود دارد و از بين مؤلفه‌هاي استرس ناباروري، موضوعات جنسي بالاترين ضريب همبستگي را با عزت نفس داشت. علاوه بر اين، بين منبع كنترل بيروني (با گرايش قدرتمندي ديگران) و مؤلفه‌هاي جنسي، ارتباطي، اجتماعي و سبك زندگي بدون فرزند و بين منبع كنترل بيروني با (گرايش شانس) و مؤلفه‌هاي ارتباطي- اجتماعي و نياز به والدشدن زنان و مردان نابارور رابطه معني‌داري (05/0p<) وجود داشت. هر چند تفاوت بين استرس ناباروري زنان و مردان نابارور معني‌دار نبود، ولي بر اساس تحقيق، نمرات زنان نابارور در تمامی مؤلفه‌هاي استرس ناباروري (اجتماعي، جنسي، ارتباطي، سبك زندگي بدون فرزند و نياز به والد بودن) بيشتر از نمرات مردان نابارور بوده و از بين اين مولفه‌ها، موضوعات جنسي در زنان نابارور و موضوعات ارتباطي در مردان نابارور بالاترين ضريب همبستگي را در جهت معكوس با عزت نفس آنها داشت. نتيجه‌گيري: نتايج تحقيق نشان داد كه در بررسي پديده ناباروري، عوامل روان‌شناختي، از اهميت نسبي برخوردار بوده و نيازمند است كه در تحقيقات آينده به نقش ساير عوامل روانشناختي، همچنين عوامل اجتماعي ناباروري توجه شود. 2 Introduction: As infertility is known as a physiological effect, it is also a psycho-social effect. Recently, there are a lot of developing research showing that psychological factors can be a cause of infertility, and also infertility can have psychological outcomes. From psychological factors, it should be to address of infertility- related stress, Internal- External locus of control and self esteem .The Objective of the Study was to investigate the relationship between infertility- related stress (sexual, social, relationship, rejection of child- free life style and need for parenthood) with self- esteem and locus of control in non- related infertile men and women in Tehran, Iran. Materials and Methods: sixty infertile men and women (Not related together), were selected randomly from Royan Infertility clinic in summer-winter, 2003, they were completed Newton`s Fert-ility Problem Inventory(1999), Rosenberg’s Self-Esteem Questionnaire(1990), and Levenson`s Inter-nality, Powerful-Others and Chance Locus of Control Scales (1975). Statistical Analysis was done with by using SPSS software. Results: The results showed a significant negative relationship (p<0.05) between self- esteem and components of (sexual, social, relationship, rejection of child- free life style and need for parenth-ood) infertility- related stress. Sexual issues had the highest correlation with self-esteem. Significant relationship (p<0.05) was found between external locus of control (believing in powerful others) and sexual, relationship, social, and rejection of child- free life style. The relationship between external locus of control (chance) and the relationship and need for parenthood components were also signi-ficant (p<0.05). Although the difference between infertility- related stress of men and women was significant, women in comparison with men had higher scores in all components. Sexual issues in women and relationship issues in men had the highest correlation with their self- esteem of all the components. Conclusion: According our result in infertility investigation, the psychological factors have Relative importance, and in the future researches, it is necessary to go behind psychological factors such as social factors. 194 205 Touran T Alizadeh توران علیزاده Department of Psychology, Faculty of Psychology, Tehran Tarbiyat Moalem University Department of Psychology, Faculty of Psychology, Tehran Tarbiyat Moalem University Iran Mohammad Naghi MN Farahani محمد نقی فراهانی Department of Psychology, Faculty of Psychology, Tehran Tarbiyat Moalem University Department of Psychology, Faculty of Psychology, Tehran Tarbiyat Moalem University Iran farahani@saba.tmu.ac.ir Mehrnaz M Shahraray مهرناز شهرآرای Department of Psychology, Faculty of Psychology, Tehran Tarbiyat Moalem University Department of Psychology, Faculty of Psychology, Tehran Tarbiyat Moalem University Iran Shahrzad Sh Alizadegan شهرزاد علیزادگان Department of Epidemiology and Reproductive Health Royan Institute Department of Epidemiology and Reproductive Health Royan Institute Iran InfertilityStressSelf- esteemLocus of controlSex differences 188.pdf Lin Y. Counseling a Taiwanese women with infertility problem. Counseling Psychology Quarterly.2002;I5(2): 209.##Abbey A., Hallmant L., Antonia J. The role of perce-ived control, attributionas, and meaning in member’s of infertile couples well- being. J Soc Clin Psychol. 1998;14:271- 296.##رجوعی، مریم. جنبه‌های روانشناختی ناباروری. پژوهش‌های روانشناختی، 1376. سال 4، شماره 4-3، ص 85-72.##Erica M., Taylor. The stress of infertility. Hum Ecol. 2002;95(1):12.##کرمی نوری رضا، آخوندی محمد مهدی. مطالعه و بـررسی جنبــه‌های روانـی- اجتماعـی ناباروری از دیدگاه پزشکان ایرانی، ششمین سمپوزیوم تخصصی باروری و نـابـاروری "جنبـه‌هـای روانشناختـی نـابـاروری"1380. اردیبهشت ماه.##پهلوانی، هاجر. بررسی اثرات ناشی از ناباروری و راهبردهای مقابله ای سلامت روانی افراد نابارور. پایان نامه کارشناسی ارشد، تهران: انستیتو روانپزشکی ایران، دانشگاه علوم پزشکی ایران، 1375.##فراهانی محمد نقی. جنبه‌های روان‌شناختی مقابله با ناباروری و نقش روان شناس. فصلنامه باروری و ناباروری، 1380. شماره هشتم، سال دوم، صفحه 52.##Peterson B. Newton C. Examining congruence between partner’ perceived infertility related stress and its rela-tionship to marital adjustment and depression in infer-tile couples. Family process.2002;42(1):59.##Rosenberg M. Scale of self-Esteem. Clin Ass Mean valid. Psycholo Rep.1987;1. 17-1.71.##Farahani M.N., Cooper M., Jin P. Is Locus of control unidimentional or multidimentional? Data from Persian translation of Rotter’s I-E Scale and Levenson’s I, P, and C Scales. Psychol Res.1996;3(4):30-42.##Malpani A. Malpani A. How have a baby: overcoming infertility.2002, Chapter 32, Unexplained infertility. pp:320- 345.##Wright J. Psychosocial distress and infertility. Men and women respond differrentlly. Fertil Steril.1991;34(2): 126-42.##Downey J., Mckinne M. The psychiatric states of wo-man, personality for infertility evaluation. Am J Orth-opsychiatry.1992;62,pp:196-205.##Abbey F. Andrews M., Hallmant L. Infertility and sub-jective well being: The mediating roles of self esteem, internal control and interpersonal conflict. J Marriage Fam.1992;54:408- 417.##گولومبوک، سوزان؛ فی وش، رابین؛رشد جنسیت، ترجمه مهرناز شهرآرای، تهران: انتشارات ققنوس. 1378.##خسروی،‌ زهره. بررسی عوامل پیش بینی کننده سلامت روان زوجهای نابارور. ششمین سمپوزیوم تخصصی باروری و ناباروری “ جنبه های روانشناسی ناباروری“‌. 1380.##Bernstein J., Fiddler A. Infertility: from a personal to a public health problem. Public Health Reports.1999; 144:(6).##کاویانی حسین، موسوی اشرف السادات. بررسی روان شناختی کتاب ” سنگی بر گوری“، آل احمد، (1360). فصلنامه باروری و ناباروری، 1380. شماره هشتم، سال دوم، ص4.##Seible M., Taymor M. Emotional aspects of infertility. Fertil Steril.1987;34:(2).##Domar A. Stress and Inferrtility in women. Fertil Steril.2000;57:324- 340.##